Гемоглобинофильные бактерии (Haemophilus)

Род Haemophilus включает неподвижные, не образующие спор, грамотрицательные, хемоорганотрофные, факультативно-анаэробные эубактерии. Содержание гуанина и цитозина (Г+Ц) в ДНК составляет 38–42 мол.%.

Морфология и культуральные свойства:

• Основная форма — палочки размером 0.4 × 2 мкм.
• Часто встречаются кокковидные формы размером 0.2–0.3 × 0.3–0.5 мкм, иногда наблюдается мицеллярный рост.
• Некоторые штаммы образуют нежную капсулу.
• Оптимальные условия роста: температура 37 °C, pH 7.3–7.5.
• Для роста на питательных средах необходимы так называемые Х-фактор (гемин) или Y-фактор (НАД).
• Рост стимулируется повышенной концентрацией CO₂ (около 5%), а свежая кровь — угнетает.
• На среде Левинталя образуют мелкие, прозрачные колонии диаметром 0.5–1 мм.

Устойчивость: Бактерии чувствительны к высушиванию, ультрафиолетовому излучению, антисептикам, дезинфектантам, антибиотикам тетрациклинового ряда и сульфаниламидам.

Экология и патогенность: Обитают в респираторном тракте человека и животных, являются условно-патогенными микроорганизмами. Могут вызывать пневмонию, бронхит, отит, менингит, эмпиему (скопление гноя в полостях тела).

Основные виды рода Haemophilus

Haemophilus influenzae

• Имеет капсулу.
• Нуждается как в Х-, так и в Y-факторах.
• Не даёт гемолиза (разрушения эритроцитов).
• На шоколадном агаре растёт как в присутствии CO₂, так и без него, формируя слизистые (М-), гладкие (S-) и шероховатые (R-) формы колоний.
• Образует кислоту на среде с глюкозой.
• Гладкие (S-) формы подразделяются на 6 сероваров (a–f) в зависимости от состава капсульного полисахарида. Шероховатые (R-) формы малоспецифичны в антигенном отношении.
• Часто вызывает бронхит, пневмонию, синуситы, а у детей — менингит и отит.

Haemophilus parainfluenzae

Отличается от H. influenzae способностью расти в отсутствие Х-фактора (требует только Y-фактор).

Haemophilus haemolyticus

• Нуждается в Х- и Y-факторах.
• Растёт на шоколадном агаре и на агаре со свежей кровью, образуя на последнем широкую зону β-гемолиза, идентичную таковой у β-гемолитических стрептококков.
• Капсулу не образует.
• Восстанавливает нитраты.
• Паразитирует в дыхательных путях человека и может быть причиной их поражения.

Haemophilus ducreyi

• Возбудитель мягкого шанкра (венерического заболевания) у человека.
• Растёт только в присутствии Х-фактора.
• Гемолиз появляется поздно и выражен слабо.

Haemophilus aegyptius

• Возбудитель эпидемического конъюнктивита (так называемой «египетской» или «гемофильной» офтальмии) населения жарких стран.
• Нуждается в Х- и Y-факторах.

Микробиологическая диагностика

Основной метод диагностики заболеваний, вызываемых бактериями рода Haemophilus, — бактериологический.

Забор материала:

• При пневмониях и бронхитах — мокрота.
• При заболеваниях верхних дыхательных путей — слизь.
• При отите и эмпиеме — гной.
• При менингите — ликвор (спинномозговая жидкость).

Лабораторное исследование:

1. Из материала готовят мазки, которые окрашивают по Граму и водным фуксином в течение 5 минут.
2. Посев материала производят немедленно после забора:
   • На среду Левинталя, содержащую Х- и Y-факторы.
   • На агар с 10% крови кролика или лошади.
   • Для подавления сопутствующей кокковой флоры в среду иногда добавляют 15–25 ЕД пенициллина.
3. Инкубируют посевы при 37 °C.
4. С подозрительных колоний делают мазки для микроскопии.
5. Типичную по морфологии и росту культуру пересевают на скошенную среду и идентифицируют по следующим признакам:
   • Потребность в Х- и Y-факторах.
   • Способность вызывать гемолиз.
   • Способность восстанавливать нитраты.
   • Наличие капсулы.

Серотипирование: У наиболее распространённого вида H. influenzae можно определить серовар с помощью реакции агглютинации (РА), реакции набухания капсулы с 5–6-часовой бульонной культурой и реакции преципитации с водно-солевым экстрактом из исследуемой культуры.

Дифференциальная диагностика: Выделенные культуры гемофильных бактерий необходимо дифференцировать с возбудителем коклюша (Bordetella pertussis).

Другие виды рода

В 9-е издание «Определителя бактерий Берги» также включены виды: H. haemoglobinophilus, H. parahaemolyticus, H. paracuniculus, H. paragallinarum, H. paraphrohaemolyticus, H. paraphrophilus, H. paracuis, H. segnis, H. somnus.

Современный контекст

Классификация и номенклатура рода Haemophilus с момента публикации исходного текста претерпели изменения. Некоторые виды были переклассифицированы в другие роды на основе геномного анализа. Например:

• H. somnus теперь известен как Histophilus somni.
• H. paragallinarum переименован в Avibacterium paragallinarum.
• H. segnis иногда относят к роду Aggregatibacter.
• Вид H. aegyptius многими исследователями считается подвидом H. influenzae — H. influenzae biovar aegyptius.

Кроме того, с внедрением вакцинации против Haemophilus influenzae типа b (Hib) в национальные календари прививок многих стран, заболеваемость инвазивными инфекциями (менингитом, эпиглоттитом), вызванными этим серотипом, резко снизилась. Однако инфекции, вызываемые нетипируемыми штаммами H. influenzae (не имеющими капсулы), остаются актуальной проблемой, особенно у взрослых с хроническими заболеваниями лёгких.