Среда Левинталя (шоколадный агар)

Среда Левинталя, также известная как шоколадный агар, — это питательная среда, обогащённая кровью и предназначенная для культивирования требовательных микроорганизмов.

Приготовление:

1. Берут свежеприготовленный 2% мясо-пептонный агар (МПА) с pH 7,3—7,5.
2. Добавляют 10% дефибринированной крови кролика или лошади.
3. Смесь тщательно размешивают и выдерживают на водяной бане при температуре 75—80 °C до приобретения средой характерного шоколадного цвета. Этот процесс, называемый «ошпариванием», приводит к лизису эритроцитов и высвобождению питательных факторов.
4. Среду охлаждают до 48 °C, разливают в стерильные чашки Петри или пробирки.
5. Проводят контроль стерильности, инкубируя среду в термостате в течение суток.

Принцип действия и применение:

Среда содержит два ключевых фактора роста, присутствующих в крови:

• Х-фактор (гемин) — термостабилен, необходим для синтеза цитохромов и каталазы.
• V-фактор (никотинамидадениндинуклеотид, НАД) — термолабилен, кофермент многих дегидрогеназ.

Ошпаривание крови делает V-фактор более доступным, так как разрушает ингибиторы в эритроцитах. Среда используется для выделения и культивирования гемоглобинофильных (требовательных к факторам крови) бактерий, таких как:

• Haemophilus influenzae (возбудитель менингита, отита, пневмонии).
• Neisseria gonorrhoeae (возбудитель гонореи).
• Streptococcus pneumoniae (пневмококк).
• Другие требовательные микроорганизмы.

Современный контекст

В современной клинической микробиологии шоколадный агар остаётся золотым стандартом для первичного выделения гемоглобинофильных бактерий. Часто его используют в комбинации с селективными добавками (например, антибиотиками) для подавления сопутствующей флоры при посеве из нестерильных зон (носоглотка). Для выделения конкретных возбудителей, таких как Neisseria gonorrhoeae, применяют специализированные селективные варианты шоколадного агара (например, среду Thayer-Martin).