Холера (азиатская холера)

Холера — острая конвенционная особо опасная инфекция (ООИ) человека, характеризующаяся тяжёлым течением и выраженной тенденцией к быстрому распространению среди больших групп населения. Возбудитель — бактерия Vibrio cholerae.

Характеристика возбудителя

Как и все вибрионы, возбудитель холеры имеет форму слегка изогнутой по длинной оси грамотрицательной палочки размерами 0,3–0,5 × 1,5–3 мкм.

Основные свойства:

Не образует спор и капсул.
Активно подвижен за счёт одного полярного жгутика (монотрих).
При неблагоприятных условиях может образовывать L-формы и гетероморфные клетки (зёрна, шары, нити, спириллы).
Хемоорганотроф, аэроб.
Хорошо и быстро растёт на щелочных питательных средах при температуре 30–37 °C, образуя в пептонной воде голубоватую плёнку, а на плотных средах — круглые выпуклые прозрачные колонии.

Биохимическая активность:

Разжижает желатин и свёрнутую сыворотку.
Выделяет индол и аммиак.
Свёртывает молоко.
Ферментирует с образованием кислоты сахарозу, маннозу, глюкозу, крахмал.
Не ферментирует арабинозу и лактозу.
Относится к 1-му хемовару Хейберга (ферментирует сахарозу и маннозу, но не арабинозу), что отличает его от нехолерных вибрионов.
Декарбоксилирует лизин и орнитин.
Синтезирует оксидазу, обладает выраженными восстановительными свойствами (например, восстанавливает нитраты в нитриты).

Факторы патогенности:

Возбудитель продуцирует большое количество ферментов, разрушающих тканевые структуры (нейраминидазу, гиалуронидазу, фибринолизин, коллагеназу, лецитиназу и др.), а также эндотоксин и энтеротоксин (холероген), играющий основную роль в развитии болезни.

Антигенная структура:

Имеет термолабильный родовой Н-антиген и термостабильный О-антиген, характеризующийся родовой, видовой и типовой специфичностью. Возбудитель классической холеры относится к О1-серогруппе и по составу фракций О-антигена (А, В, С) подразделяется на три серовара:

Огава (АВ)
Инаба (АС)
Гикошима (ABC)

Устойчивость и чувствительность

Возбудитель холеры чувствителен к кислотам, высыханию, свету, повышенной температуре, антагонистам, дезинфектантам, антисептикам и антибиотикам тетрациклинового ряда. Однако способен относительно долго сохраняться в испражнениях, загрязнённом белье, почве и воде, особенно в темноте при щелочной реакции среды и низкой температуре.

Патогенез

Возбудитель проникает в организм человека с водой и пищей, преодолевает кислотный барьер желудка и локализуется в тонком кишечнике. Патогенез определяется способностью бактерии:

Выделять эктоферменты (особенно нейраминидазу).
Прикрепляться с помощью фимбрий к энтероцитам.
Бурно размножаться на их поверхности.
Выделять эндотоксин и экзотоксин (энтеротоксин).

Основное значение в развитии холерного синдрома (профузной диареи и рвоты) принадлежит энтеротоксину. Он, адсорбируясь на ганглиозидных рецепторах энтероцитов, активирует систему цАМФ-аденилатциклаза, что вызывает гиперсекрецию воды и солей, особенно хлорида калия, в просвет кишечника.

Микробиологическая диагностика

Микробиологическая диагностика холеры обязательна во всех случаях подозрения на это заболевание и играет ключевую роль в эффективности терапии и борьбе с распространением инфекции. Проводится в специальных лабораториях с соблюдением строгого противоэпидемического режима.

Главный метод — бактериологический (выделение культуры и её идентификация). Для срочных противоэпидемических мероприятий также применяют ускоренные методы:

Прямая реакция иммунофлюоресценции (РИФ) с нативным материалом или подрощенной культурой.
Иммуноферментный анализ (ИФА).
Реакция иммобилизации вибрионов под влиянием специфического фага и О1-антисыворотки.
Реакция микроагглютинации в фазовом контрасте.
Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) с антительным эритроцитарным диагностикумом.

Даже при получении чётких положительных или отрицательных результатов ускоренными методами обязательно проводится полное бактериологическое исследование.

Материал для исследования: испражнения, рвотные массы, секционный материал. Собирается в стерильную широкогорлую стеклянную банку с соблюдением правил асептики и быстро доставляется в лабораторию. При задержке более чем на 3 часа материал помещают в консервирующие среды (например, щелочную пептонную воду с теллуритом калия).

Этапы бактериологического исследования:

Микроскопия: мазки, окрашенные по Граму и водным фуксином.
Посев: в щелочную пептонную воду с теллуритом калия, на щелочной агар на переваре Хоттингера и на селективные среды (например, TCBS).
Через 6–8 часов инкубации: изучают рост в пептонной воде, делают пересев на вторую пептонную воду и проводят ускоренную идентификацию (микроскопия, реакция агглютинации на стекле с О1-антисывороткой, пробы на подвижность и иммобилизацию). Положительный ответ позволяет поставить предварительный диагноз.
Через 14–18 часов: изучают рост на второй пептонной воде и плотных средах. С 3–5 колоний проводят РА с типовыми сыворотками (огава и инаба), отсев на дифференциальные среды (сахарозо-лактозный агар) и в бульон.
После 3–4 часов инкубации бульонной культуры: ставят развёрнутую РА, определяют ферменты по Хейбергу, чувствительность к фагам С4 и Эль-Тор-2. Выделение культуры, дающей положительные тесты, позволяет сделать вывод об обнаружении холерного вибриона. Весь процесс занимает 18–24 часа. При необходимости исследование продолжают для определения биовара, серовара и фаговара.

Современный контекст

В 1992 году в Индии и других странах Юго-Восточной Азии были зарегистрированы случаи холеры, вызванные новым, ранее неизвестным сероваром холерного вибриона — Vibrio cholerae O139 (Бенгал). Этот штамм быстро распространился, вызвав крупные эпидемии, и показал, что иммунитет к классическому серовару O1 не защищает от O139.

Кроме того, из воды и от больных людей часто выделяются так называемые НАГ-вибрионы (неагглютинирующиеся), которые не агглютинируются О1-сывороткой. Долгое время считалось, что они не вызывают холеру, однако некоторые штаммы NAG-вибрионов (относящиеся к другим серогруппам, например, O75, O141) могут продуцировать холерный токсин или его аналоги и быть причиной холероподобных заболеваний.

Таким образом, современная эпидемиология холеры учитывает циркуляцию как классического вибриона O1 (в двух биоварах: классический и Эль-Тор), так и вибриона O139, а также потенциальную роль некоторых других серогрупп.