Реакция агглютинации на стекле
Реакция агглютинации на стекле — это экспресс-методика постановки реакции агглютинации (РА), в которой иммунную сыворотку и корпускулярный антиген смешивают на поверхности чистого предметного или специального (с кольцами) стекла.
Так как оба ингредиента берут в концентрированном виде, а их взаимодействие происходит при циркулярном покачивании (иногда с лёгким подогреванием), реакция наступает очень быстро — в течение нескольких минут или даже секунд. Это выгодно отличает её от реакции в пробирках.
Недостатки методики:
- Более низкая чувствительность по сравнению с классической РА в пробирках.
- При использовании неадсорбированных сывороток она недостаточно специфична, и её результат должен быть подтверждён РА в пробирках.
Техника постановки реакции
- На поверхность стекла с помощью микропипетки или петли наносят капли цельной или слегка разведённой сыворотки.
- К ним добавляют каплю концентрированного корпускулярного антигена. В
качестве антигена может использоваться:
- Взвесь бактерий.
- Взвесь эритроцитов.
- Частицы латекса с адсорбированным на их поверхности растворимым антигеном.
- Капли смешивают бактериологической петлёй, стеклянной палочкой или циркулярным покачиванием самого стекла.
Особый случай: в качестве антигена можно использовать живую культуру с плотной питательной среды (из колонии или сплошного роста). В этом случае её предварительно суспендируют на этом же стекле в капле физиологического раствора, а затем соединяют с каплей сыворотки.
Учёт результатов
- Положительная реакция: через несколько минут после соединения жидкость в капле становится прозрачной, а по её краям появляются хлопья или зёрна агглютината.
- Для облегчения регистрации стандартные диагностикумы иногда подкрашивают, например, генцианвиолетом.
- В сомнительных случаях к смеси добавляют каплю физиологического раствора.
Контроли реакции
Реакция должна сопровождаться контрольными пробами:
- Капля бактериальной суспензии + капля физиологического раствора (контроль антигена).
- Капля исследуемой сыворотки + капля физиологического раствора (контроль сыворотки).
