Выделение (изоляция) культуры

Совокупность технических приёмов, позволяющих получить чистую культуру определённого вида микроорганизмов из разнообразных образцов. Такими образцами могут быть:

Материал от больных или здоровых людей и животных.
Пробы из объектов внешней среды (вода, почва, воздух, поверхности).

Если в исходном образце количество целевых микроорганизмов невелико, для их накопления предварительно используют среды обогащения.

Основные методы выделения

Наиболее эффективный способ получения чистой культуры из микробной ассоциации — метод механического разобщения. Он включает:

Посев исходного материала петлёй или шпателем на поверхность плотной питательной среды.
Отбор изолированных колоний, выросших из отдельных клеток.
Пересев этих колоний на свежие среды для накопления чистой культуры.

Важно понимать, что чистая культура, полученная таким способом, по сути, происходит из одной особи (клетки) и может не отражать свойства всей популяции, которая обычно генетически гетерогенна. Чтобы минимизировать связанные с этим ошибки, необходимо исследовать несколько культур, выделенных из одного образца, или работать со смесью таких изолятов.

Специальные методы изоляции

Для выделения определённых групп микроорганизмов применяют воздействие физических или химических факторов, подавляющих нецелевые виды:

Спорообразующие бактерии изолируют от неспорообразующих путём прогревания образца при 80 °C в течение 30 минут (споры выживают).
Кислотоустойчивые микобактерии (например, возбудитель туберкулёза) отделяют от других бактерий обработкой образца 6% серной кислотой.
Вирусы выделяют от бактерий, пропуская образец через бактериальные фильтры и добавляя в фильтрат антибиотики широкого спектра действия.
Конкретные виды бактерий можно изолировать, используя селективные питательные среды, которые поддерживают рост только целевых микроорганизмов.

Контроль чистоты

При выполнении всех манипуляций по выделению культуры необходимо строго соблюдать правила асептики, чтобы полностью исключить контаминацию (загрязнение) образца или чистой культуры микроорганизмами из воздуха или с поверхностей.

После успешного выделения и накопления достаточного количества биомассы чистую культуру идентифицируют (определяют её видовую принадлежность).

См. также: Бактериологический метод, Посевы бактериологические, Идентификация микроорганизмов.