Оксидазы
Оксидазы — это группа ферментов из класса оксидоредуктаз. Они катализируют реакции переноса электронов с субстрата на молекулярный кислород, активируя его. Эти ферменты характерны для аэробных организмов и, как правило, отсутствуют у облигатных анаэробов и большинства факультативных анаэробов.
Определение наличия оксидаз используется в микробиологии для идентификации выделенных культур бактерий.
Определение цитохром-c-оксидазы (оксидазный тест)
Для проведения теста на оксидазу (цитохром-c-оксидазу) используют фильтровальную бумагу, смоченную 1% раствором тетраметил-п-фенилендиаминдигидрохлорида (реактив Ковача). На эту бумагу платиновой петлёй или стеклянной палочкой наносят полоску исследуемой культуры.
- Положительный результат: В течение нескольких секунд появляется фиолетово-синее окрашивание по ходу полосы.
- Отрицательный результат: Окрашивание не возникает или появляется поздно (через 10–60 секунд).
Современный контекст
Оксидазный тест остаётся одним из ключевых методов в рутинной бактериологической диагностике, особенно для дифференциации родов бактерий (например, для различения Pseudomonas (оксидазоположительные) от Enterobacteriaceae (оксидазоотрицательные)). В современных лабораториях наряду с классическим бумажным методом используются коммерческие тест-системы (полоски, таблетки), содержащие стабильные формы реагента. Важно использовать платиновую или инертную петлю, так как железо или хром из никелированных петель могут дать ложноположительную реакцию.
