Материалы для исследования (микробиология)
Материалы для исследования — это нормальные или патологические субстраты, взятые от здорового или больного животного (включая человека), либо объекты внешней среды, в которых осуществляется поиск микроорганизмов, их токсинов или антигенов.
Классификация материалов по стерильности
- Стерильные в норме: Кровь, спинномозговая (ликвор), перитонеальная, плевральная, суставная, перикардиальная жидкости; внутренние органы, не имеющие анатомической связи с внешней средой, а также органы, связанные с ней (печень, поджелудочная железа, предстательная железа, мочевой пузырь, мочеточники и почки, альвеолы лёгких, матка, маточные трубы, яичники).
- Нестерильные в норме: Содержимое полостей рта, носа, глотки, желудка, кишечника, влагалища, конъюнктивального мешка глаза, наружного слухового прохода, кожные покровы, а также моча и желчь. Последние два материала секретируются стерильными, но контаминируются (обсеменяются) микроорганизмами в выводящих путях.
Критерии оценки микробов, выделенных из стерильных и нестерильных в норме материалов, различаются (см. статью «Возбудитель болезни»).
Общие требования к забору, транспортировке и обработке материалов
Результаты диагностики многих инфекционных заболеваний напрямую зависят от правильного выбора материала, соблюдения условий его забора, доставки, хранения и обработки. Поэтому необходимо строго придерживаться как специфических (для отдельных заболеваний и материалов), так и общих правил.
- Соответствие локализации. Вид материала должен соответствовать локализации предполагаемого возбудителя на данном этапе развития болезни. При отсутствии или неясности локальных очагов в первую очередь исследуется кровь.
- Достаточный объём. Необходимо брать достаточное количество материала. Например, при исследовании крови нельзя ограничиваться 1–2 мл.
- Своевременность забора. Материал берут как можно раньше от начала заболевания. В начальном периоде возбудители выделяются чаще, их больше, и для них характерна более типичная локализация. Ранняя этиологическая диагностика позволяет раньше начать эффективное лечение и профилактику.
- Забор до начала терапии. Забор материала осуществляют до начала антимикробной терапии. Если лечение уже начато, его желательно прервать на 1 день перед исследованием. Аналогично поступают при повторном исследовании.
- Предотвращение контаминации. Необходимо предотвратить возможную контаминацию материала нормальной микрофлорой пациента и микроорганизмами окружающей среды. Для этого забор проводят в асептических условиях (в процедурном кабинете) стерильными инструментами в стерильную посуду. Пути забора должны быть максимально освобождены от микрофлоры (например, полоскание рта и глотки стерильным физраствором перед взятием мокроты, туалет входа в уретру перед забором мочи, удаление поверхностных масс с язвы или раны).
- Исключение посторонних веществ. Следует исключить попадание в материал дезинфектантов, антисептиков, антибиотиков, контакт с металлами, обладающими олигодинамическим действием, а также с ватой, содержащей свободные жирные кислоты.
- Биологическая безопасность. Любой клинический материал считается потенциально опасным. При его заборе, хранении, доставке и обработке необходимо соблюдать такие же меры техники безопасности, как в бактериологической лаборатории.
- Скорость доставки. Материал должен быть доставлен в лабораторию в максимально короткие сроки. Посев материала «у постели больного» несёт высокий риск контаминации воздушной микрофлорой палат. При необходимости срочного посева его проводят в процедурных кабинетах. Если быстрая доставка невозможна (например, ночью), материал помещают в бытовой холодильник (с учётом п. 7 о безопасности!) или добавляют консервант (см. статью «Консервирование исследуемого материала»).
- Сопроводительная документация. Каждый материал,
доставляемый в лабораторию, должен сопровождаться направлением, в
котором указывают:
- Наименование материала.
- Название направляющего учреждения.
- Фамилию, имя, отчество, возраст и адрес пациента.
- Дату заболевания, день и час взятия материала.
- Предполагаемый клинический диагноз.
- Цель и метод исследования.
- Подпись врача.
- Условия транспортировки. В процессе доставки материал следует оберегать от действия света, тепла, холода и механических повреждений. Оптимальна транспортировка в специальных металлических контейнерах, которые легко чистить и обеззараживать. Нельзя отправлять материал с пациентами или случайными людьми.
- Очистка материала в лаборатории. Нестерильный в
норме материал в лаборатории в ряде случаев можно очистить от части
сопутствующей микрофлоры, например:
- Обработкой кислотой — при исследовании на микобактерии.
- Прогреванием — для выделения спорообразующих микробов.
- Добавлением антибиотиков — при выделении вирусов.
- Отмыванием — при исследовании мокроты.
- Подготовка к анализу. Неоднородные по консистенции материалы в лаборатории гомогенизируют (например, с помощью муколитиков), а однородные могут быть обогащены центрифугированием, адсорбцией или флотацией.
- Утилизация. После исследования остатки материала подлежат уничтожению (предпочтительно автоклавированием или сжиганием), а посуда, контейнеры и инструменты, контактировавшие с ним, — обеззараживанию.
Современный контекст
Сегодня принципы работы с биологическим материалом регламентируются строгими национальными и международными стандартами (например, ISO, CLSI, рекомендациями ВОЗ и локальными клиническими рекомендациями). Широко внедрены:
- Закрытые вакуумные системы для забора крови и других жидкостей, минимизирующие риск контаминации и инфицирования персонала.
- Стандартизированные транспортные среды и контейнеры, обеспечивающие сохранность разных типов микроорганизмов (аэробных, анаэробных, вирусов).
- Автоматизированные системы для первичной обработки и посева материала.
- Чёткие алгоритмы и сроки доставки в лабораторию для различных видов исследований (бактериологических, молекулярно-генетических, вирусологических).
- Повышенное внимание к биобезопасности, особенно при работе с материалами, потенциально содержащими возбудители особо опасных или новых инфекций.
