Чума
Чума — тяжёлое острое инфекционное заболевание человека и животных из группы особо опасных инфекций (ООИ), вызываемое бактерией Yersinia pestis.
Возбудитель
Возбудитель чумы — это грамотрицательная палочковидная или овоидная неподвижная бактерия, способная образовывать нежную капсулу (непостоянно). Её размеры составляют 0,3–0,5 × 1–2 мкм. Часто наблюдаются инволюционные (дегенеративные) формы. Молодые культуры окрашиваются биполярно.
Культуральные и биохимические свойства:
- Оптимальные условия роста: температура +28 °C (хотя возможен рост в диапазоне +2…+40 °C), pH 6,9–7,0.
- Рост на питательных средах: на мясных средах рост появляется только при посеве большой дозы, обычно на 1–2-й день. На плотных средах формирует шероховатые колонии (R-форма), в жидких средах — образует плёнку на поверхности, от которой ко дну тянутся слизистые нити («сталактиты»); в последующем образуется осадок.
- Биохимическая активность: ферментирует с выделением кислоты ксилозу, синтезирует плазмокоагулазу, фибринолизин, гемолизин, лецитиназу, РНК-азу, сероводород. Пробы на гидролиз мочевины, ферментацию рамнозы, адонита и арбутина отрицательны.
- Варианты: в зависимости от способности ферментировать глицерин выделяют «положительные» и «отрицательные» варианты.
Антигенные и токсигенные свойства: бактерия содержит соматические и поверхностные антигены, в том числе антигены V–W, с которыми связывают вирулентность микроба. Выделяет в среду токсин. Является паразитом млекопитающих.
Диагностика
Клиническая картина чумы довольно характерна, тем не менее бактериологическая диагностика обязательна во всех случаях. Её проводят в специальных противочумных лабораториях при строгом соблюдении правил, исключающих заражение персонала и вынос возбудителя за пределы лаборатории. Используют бактериологический и экспериментальный методы.
1. Взятие и транспортировка материала: исследуют кровь, мокроту, пунктат из бубона, отделяемое кожных поражений. Посуду с материалом заворачивают в салфетки, смоченные дезинфицирующим средством, помещают в металлический контейнер, опечатывают и с доверенным лицом доставляют в ближайшее противочумное учреждение.
2. Микроскопия: в лаборатории из материала готовят мазки, обрабатывают противочумной люминесцирующей сывороткой и окрашивают щелочной синькой Леффлера (см. Красители) и по Граму. Подозрительными на чуму являются положительная реакция иммунофлюоресценции (РИФ), а также присутствие в мазках грамотрицательных овоидных биполярно окрашенных беспорядочно расположенных палочек.
3. Выделение культуры: культуру выделяют посевом на агар и бульон Хоттингера или элективные среды. При посеве загрязнённого материала к средам добавляют сульфат натрия и генцианвиолет в конечных разведениях 1:40 000 и 1:100 000. Среды инкубируют при +28…+30 °C. Через 12–20 часов из подозрительных колоний (серовато-белые с плотным центром и полупрозрачной изрезанной периферией) делают отсев на скошенный мясо-пептонный агар (МПА).
4. Идентификация: для идентификации используют выявление описанных выше признаков, решающие из которых — результаты биопробы. Для дифференциации с возбудителем псевдотуберкулёза (Yersinia pseudotuberculosis) определяют:
- лизис чумным фагом;
- подвижность в придавленной капле (у Y. pestis отсутствует);
- рост на «голодном» агаре;
- ферментацию рамнозы и мочевины (у Y. pestis отрицательны).
5. Биологическая проба (биопроба): биопробу ставят на морских свинках. При внутрибрюшинном заражении животные погибают на 3–5-е сутки. Экссудат из брюшной полости, кровь, соскоб из внутренних органов засевают на среды для выделения чистой культуры. В мазках из этих материалов в положительных случаях обнаруживают огромное количество типичных палочек.
Современный контекст
Современная диагностика чумы, помимо классических бактериологических методов, включает методы молекулярной генетики, такие как полимеразная цепная реакция (ПЦР), позволяющая быстро и точно идентифицировать ДНК возбудителя даже в минимальных количествах. Также широко применяются иммунохроматографические экспресс-тесты для обнаружения специфических антигенов Yersinia pestis в полевых условиях. Понимание генетической структуры и эволюции возбудителя, полученное в последние десятилетия, позволило уточнить его географическое происхождение и пути распространения в исторические эпохи.
