Гисса среды

Среды Гисса — это специальные питательные среды, содержащие углеводы и индикатор кислотности. Они используются в микробиологии для определения сахаролитических (сахарорасщепляющих) свойств микроорганизмов в процессе их идентификации.

Сухие коммерческие среды содержат:

Приготовление и использование полужидкой среды

Для приготовления полужидкой среды Гисса 20 г сухого порошка растворяют в 1 л дистиллированной воды при подогревании. Раствор доводят до кипения, разливают в пробирки по 3–4 мл и автоклавируют 30 минут при 112 °C.

Правильно приготовленная среда должна иметь светло-розовый цвет и не давать роста посторонней микрофлоры в течение суточной инкубации в термостате при 37 °C.

Исследуемую культуру засевают уколом петли в столбик среды и инкубируют в термостате при 37 °C в течение суток или дольше, в зависимости от идентифицируемого вида.

Интерпретация результатов:

  • Кислотообразование: Перекрашивание среды в синий или голубой цвет указывает на ферментацию сахара с образованием кислоты.
  • Газообразование: Такое же перекрашивание среды и появление в её толще пузырьков газа свидетельствует о ферментации сахара с выделением кислоты и газа.
  • Отсутствие активности: Если у микроба нет ферментативной активности, среда может помутнеть (из-за роста бактерий), но цвет не меняет.

Приготовление и использование жидкой среды

Жидкие среды Гисса готовят на 1%-ной пептонной воде с pH 7,4, добавляя 0,5–1% углевода и индикатор Андраде или бромтимоловый синий. В пробирки со средой помещают поплавки (колбы Дюрама) для улавливания газа. Среду стерилизуют в автоклаве при 112 °C в течение 30 минут.

Интерпретация результатов:

  • Кислотообразование: Регистрируется по изменению цвета среды: в розовый с индикатором Андраде или в жёлтый с бромтимоловым синим.
  • Газообразование: Определяется по накоплению газа в поплавках.
  • Начальный цвет: При отсутствии ферментации среда имеет соломенно-жёлтый цвет с индикатором Андраде и жёлто-зелёный с бромтимоловым синим.