Бруцеллёз

Бруцеллёз — хроническое или остро-хроническое инфекционное заболевание человека и животных, вызываемое бактериями рода Brucella. В зависимости от вида возбудителя и его природного хозяина различают несколько форм болезни, схожих по патогенезу и клинической картине, но различающихся по эпидемиологии и тяжести течения:

Бруцеллёз мелкого рогатого скота (Brucella melitensis).
Бруцеллёз крупного рогатого скота (Brucella abortus).
Бруцеллёз свиней (Brucella suis).
Бруцеллёз овец, собак, крыс и других животных.

В патологии человека наибольшее значение имеют первые две формы.

Пути заражения и патогенез

Возбудители проникают в организм человека:

Алиментарным путём — с молоком, молочными продуктами (например, сыром), мясом.
Контактным путём — через повреждённую кожу или слизистые оболочки при работе с абортированными плодами, последами, выделениями больных животных.

Попав в организм, бактерии размножаются внутри клеток лимфоидной системы, формируя гранулёмы в печени, селезёнке, костном мозге и лимфатических узлах. В острой фазе болезни возбудитель обнаруживается в крови и выделяется с мочой, молоком, вагинальным секретом, реже — с калом.

В процессе болезни развивается сенсибилизация организма к антигенам возбудителя, появляются полные и неполные антитела, которые могут достигать высоких титров и сохраняться длительное время после выздоровления. Для профилактики, а иногда и для терапии хронических форм, применяют живую вакцину из штамма B. abortus 19-BA, которая также вызывает сенсибилизацию организма.

Методы диагностики

Для постановки диагноза используют культуральный, серологический, экспериментальный и аллергический методы.

Культуральный метод (выделение возбудителя)

Бруцеллы могут быть выделены непосредственно из патологического материала (кровь, костный мозг, лимфоузлы), а также из объектов внешней среды с помощью прямой или непрямой реакции иммунофлюоресценции (РИФ). Этот же метод используют для идентификации выделенной культуры, особенно если она контаминирована другими бактериями.

Кровь: В острую фазу болезни культура выделяется из крови у 65–90% больных бруцеллёзом мелкого рогатого скота и у 5–15% больных бруцеллёзом крупного рогатого скота. Кровь для посева (10–20 мл) забирают из локтевой вены на высоте лихорадки, до назначения антибиотиков или в перерыве между их приёмом. Её засевают по 5–10 мл в два флакона с мясо-пептонным бульоном и сывороточно-декстрозной средой по методу Кастаньеды.
Костный мозг и лимфоузлы: Хорошие результаты в острой и хронической стадиях даёт посев пунктата костного мозга. Пунктат лимфоузлов или костного мозга засевают по несколько капель в две пробирки с теми же средами.
Моча: Стерильно взятую мочу обрабатывают бруцеллёзной агглютинирующей сывороткой в разведении 1:16, центрифугируют, а осадок высевают на те же среды с добавлением генцианвиолета в концентрации 1:200 000.

Один флакон (пробирку) инкубируют в аэробных условиях, другой — в атмосфере с 10% содержанием CO₂. Посевы просматривают каждые 3–4 дня. Если в течение 5–6 недель культуру выделить не удаётся, дают отрицательный ответ. Выделение культур допускается только в специальных лабораториях при строгом соблюдении правил биологической безопасности.

Идентификация культуры: На принадлежность к роду Brucella указывают типичная морфология бактерий и колоний, грамотрицательная окраска, положительная реакция агглютинации на стекле с поливалентной бруцеллёзной сывороткой. Для видовой идентификации используют признаки, описанные в статье о роде Brucella.

Серологические методы

В сыворотке больных бруцеллёзом накапливаются агглютинирующие (вначале IgM, затем IgG), неполные блокирующие (IgA и IgG) и опсонические (IgG) антитела. Для их выявления используют:

Реакция агглютинации (РА) Райта (пробирочная).
- Проста, чувствительна, специфична. Диагностический титр достигается ко второй неделе болезни.
- Проводится с разведениями сыворотки от 1:50 до 1:800 и единым бруцеллёзным диагностикумом (взвесь убитых нагреванием и фенолом бруцелл).
- Учёт проводят на следующий день после инкубации при 37 °C.
- Оценка результата:
  - Менее 100 МЕ — сомнительная.
  - 100–200 МЕ — положительная.
  - Выше 200 МЕ — резко положительная.
- При хроническом течении число положительных реакций сокращается.
Реакция агглютинации Хеддлсона (пластинчатая).
- Применяется при массовых обследованиях, часто в сочетании с аллергической пробой.
- Быстрая (ответ через 8 минут), специфичная, достаточно чувствительная.
- На обезжиренное стекло наносят капли исследуемой сыворотки и смешивают их с диагностикумом.
- Оценка результата:
  - Агглютинация во всех трёх дозах — резко положительный.
  - Агглютинация в первой и второй дозах — положительный.
  - Агглютинация только в первой дозе — сомнительный.
  - Отсутствие агглютинации — отрицательный.
Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Диагностическим считается титр 1:100 и выше.
Реакция Кумбса (антиглобулиновая проба). Применяется для выявления неполных (блокирующих) антител при отрицательной реакции Райта, особенно при подострых и хронических формах. Титр этих антител может быть в 2–8 раз выше, чем агглютининов.
Опсоно-фагоцитарная реакция. Из-за вариабельности результатов и трудоёмкости применяется редко.

Аллергический метод (проба Бюрне)

Применяется для оценки состояния сенсибилизации (гиперчувствительности замедленного типа) к бруцеллам. Положительна у больных, инфицированных лиц и у привитых живой вакциной (в период от 2 до 13 месяцев после вакцинации).

Техника: Внутрикожно в ладонную поверхность предплечья вводят 0,1 мл бруцеллина.
Учёт: Через 24 часа путём осмотра и пальпации.
Оценка результата:
- Положительная реакция: инфильтрат размером более 2×3 см (появляется через 6–8 часов, максимум к 24–48 часам).
- Отрицательная реакция: отсутствие инфильтрата, размеры менее 2×3 см, позднее появление или только отёк. Рано появившийся (до 6 часов) и быстро исчезнувший отёк также расценивается как отрицательный результат.

Диагностическая ценность аллергического метода ограничена, так как сенсибилизация к бруцеллину часто наблюдается у инфицированных и уже выздоровевших людей.