Среда Левина (лактозоэозинметиленовый агар)
Дифференциально-селективная питательная среда, предназначенная для выделения и первичной идентификации бактерий семейства Enterobacteriaceae. Её ключевая функция — дифференциация микроорганизмов по способности ферментировать лактозу.
Принцип действия и оценка роста:
- Лактозоположительные бактерии (ферментирующие лактозу, например, Escherichia coli): образуют колонии тёмно-синего, почти чёрного цвета.
- Лактозоотрицательные бактерии (не ферментирующие лактозу, например, Salmonella spp., Shigella spp.): формируют бесцветные или светло-фиолетовые колонии, цвет которых не отличается от цвета среды.
- Бактерии рода Proteus: часто дают изолированные колонии оранжевого цвета.
Состав и приготовление (оригинальный рецепт):
Для приготовления 100 мл среды необходимо:
- Основу: 100 мл 1,5% мясо-пептонного агара (МПА) с pH 7,2–7,4.
- Добавить к основе:
- 2 мл 0,5% водного раствора метиленового синего;
- 1,5 мл 2% водного раствора эозина;
- 2 г лактозы;
- 0,2 г дигидрофосфата калия (K₂HPO₄).
- Тщательно перемешать, расплавить агар и разлить по чашкам Петри.
Готовая среда имеет светло-фиолетовый цвет. В настоящее время промышленность выпускает готовый сухой препарат, который разводят по инструкции производителя.
Вариант среды: Лактозобромтимоловый агар — модификация среды Левина, которая не обладает ингибирующим действием на Klebsiella rhinoscleromatis (возбудитель склеромы).
Современный контекст
Среда Левина является классическим, но в значительной степени устаревшим методом. В современной клинической микробиологии для выделения и дифференциации энтеробактерий используются более селективные и информативные среды, такие как агар МакКонки (MacConkey agar) или среда Эндо (Endo agar). Эти среды также основаны на ферментации лактозы, но содержат дополнительные ингибиторы (соли жёлчных кислот, кристаллический фиолетовый) для подавления роста грамположительной флоры, что повышает их эффективность. Среда Левина может применяться в учебных целях или как дополнительный метод в некоторых протоколах.
