Капсулы выявление
Для выявления капсулы у бактерий используют микроскопические и иммунологические методы.
В тканях и патологических субстратах (мокрота, слизь, гной) капсула выявляется при любом методе окраски в виде неокрашенной (светлой) зоны между окрашенным телом бактерии и окружающим субстратом.
В культуре для выявления капсулы применяют красители: алциановый голубой и по методу Романовского — Гимзы.
Метод Гинса — Бурри (метод негативного контрастирования тушью):
- На конец предметного стекла рядом помещают каплю мелкодисперсной туши и петлю исследуемой культуры, взвешенной в физиологическом растворе.
- Капли тщательно смешивают краем шлифованного стекла и им же делают тонкий мазок.
- Мазок высушивают на воздухе, фиксируют метанолом или смесью Никифорова.
- Окрашивают по Гинсу карболовым фуксином, разведённым в соотношении 1:3, в течение 3–5 минут.
- Затем препарат промывают водой, высушивают и микроскопируют.
При наличии капсул на тёмном (дымчатом) фоне туши видны неокрашенные овальные участки, внутри которых располагаются бактерии, окрашенные в красный цвет. Этим способом можно выявить капсулу толщиной 0,5 мкм и более.
Микрокапсулу и слизистый слой определяют с помощью серологических реакций, в частности:
- Реакцией агглютинации (РА) на стекле с противокапсульными сыворотками.
- Реакцией набухания капсулы (см. Набухание капсулы иммунное).
Современный контекст
Метод негативного контрастирования тушью (аналог метода Гинса — Бурри) остаётся одним из основных и простых способов визуализации капсул в рутинной лабораторной практике. Для более точной идентификации капсульных антигенов и типирования штаммов (например, Streptococcus pneumoniae, Klebsiella spp.) широко применяются иммунологические методы: латекс-агглютинация, встречный иммуноэлектрофорез и реакция набухания капсулы (реакция Нейфельда). В современных исследованиях для изучения структуры и биосинтеза капсулы также используют молекулярно-генетические методы (ПЦР, секвенирование).
