Христенсена среда

Среда Христенсена — это селективная питательная среда, используемая в микробиологии для выявления уреазной активности у бактерий. Уреаза — это фермент, расщепляющий мочевину с образованием аммиака и углекислого газа. Наличие этого фермента является важным диагностическим признаком для ряда микроорганизмов, например, для некоторых представителей семейства Enterobacteriaceae (родов Proteus, Klebsiella) и для Helicobacter pylori.

Приготовление среды

Основная (концентрированная) среда:

Для приготовления 100 мл основы растворяют в дистиллированной воде следующие компоненты:

• Пептон — 1 г
• Хлорид натрия (NaCl) — 5 г
• Глюкоза — 1 г
• Дигидрофосфат калия (KH₂PO₄) — 2 г
• Мочевина — 20 г
• 0.2% водный раствор фенолового красного (индикатор) — 6 мл

Полученный раствор доводят до pH 6.8 — 6.9 и стерилизуют текучим паром в течение 20 минут. Автоклавирование при высоких температурах не применяется, так как мочевина при нагревании разлагается.

Рабочие среды:

Перед использованием основную среду разводят в 10 раз для получения рабочей среды нужной консистенции:

• Жидкая среда: разведение производится стерильной водой.
• Плотная (агаризованная) среда: разведение производится стерильным 1.5% агаровым гелем.

Принцип работы и учёт результатов

После засева исследуемой культурой и инкубации среда оценивается на изменение цвета. Ферментация мочевины уреазоположительными бактериями приводит к выделению аммиака. Это вызывает защелачивание среды, что отражается на индикаторе феноловом красном: его цвет меняется с жёлтого (кислая среда) на ярко-малиново-красный (щелочная среда). Отсутствие изменения цвета указывает на отсутствие уреазной активности.