Среда Лейфзона

Среда Лейфзона — бактериологическая питательная среда, используемая для дифференциации типов ферментации глюкозы микроорганизмами (окислительного или бродильного).

Состав и приготовление

Среду готовят путём растворения следующих компонентов в 1 литре дистиллированной воды:

  • Пептон — 2 г
  • Хлорид натрия (NaCl) — 5 г
  • Дигидрофосфат калия (однозамещённый фосфат калия, KH₂PO₄) — 0,3 г
  • Глюкоза — 10 г
  • Агар — 3 г
  • Водный раствор бромтимолового синего (1%) — 3 мл

Полученному раствору устанавливают pH в диапазоне 7,1 — 7,2, разливают в пробирки и стерилизуют в автоклаве в течение 15 минут при температуре 115 °C.

Методика проведения теста

  1. Исследуемую бактериальную культуру засевают в две пробирки со средой.
  2. В одну из пробирок наслаивают 0,5 мл стерильного вазелинового масла, которое создаёт анаэробные условия, перекрывая доступ кислорода.
  3. Пробирки инкубируют при 37 °C в течение 4 суток, проводя ежедневную оценку результата.

Интерпретация результатов

Изменение цвета среды обусловлено работом индикатора бромтимолового синего, который меняет окраску в зависимости от pH (кислотности), возникающей в результате ферментации глюкозы.

  • Анаэробный (бродильный) тип ферментации: Изменение цвета среды с жёлто-зелёного на жёлтый только в пробирке под вазелиновым маслом. Это указывает на способность бактерии сбраживать глюкосу в анаэробных условиях.
  • Окислительный (аэробный) тип ферментации: Изменение цвета на жёлтый только в пробирке без масла. Это означает, что бактерия утилизирует глюкозу только в присутствии кислорода.
  • Отсутствие ферментации: Цвет среды остаётся неизменным в обеих пробирках. Это говорит о том, что данный микроорганизм не способен утилизировать глюкозу ни одним из указанных путей.

Современный контекст

Среда Лейфзона является классическим методом дифференциации бактерий, в частности, для идентификации неферментирующих грамотрицательных палочек (например, Pseudomonas aeruginosa) и их отличия от энтеробактерий. Хотя метод до сих пор используется в учебных целях и некоторых рутинных лабораторных тестах, в современной клинической микробиологии его часто заменяют более быстрыми, стандартизированными и автоматизированными системами идентификации (например, API, VITEK, MALDI-TOF), которые позволяют определить биохимический профиль микроорганизма за несколько часов.