Опсонины

Опсонины — это вещества в сыворотке крови, которые подготавливают чужеродные частицы (например, бактерии) к поглощению фагоцитами, покрывая их поверхность. Этот процесс называется опсонизацией. Для оценки опсонической активности сыворотки крови и цельной крови применяют определение опсонического индекса (ОИ), опсоно-фагоцитарного индекса (ОФИ) и титра опсонинов (ТО).

Повышение показателей этих тестов у больных по сравнению со здоровыми людьми или у одного человека в динамике болезни оценивают как благоприятный прогностический признак; слабое повышение или его отсутствие — как неблагоприятный.

Методы определения

Опсонический индекс (ОИ) — это отношение фагоцитарного числа исследуемой сыворотки к фагоцитарному числу нормальной (контрольной) сыворотки. Фагоцитарное число — это частное от деления количества поглощённых частиц на число фагоцитов. ОИ выявляет изменения в опсонической активности, обусловленные системой комплемента и нормальными антителами.

Методика определения ОИ:

  1. Образцы исследуемой и контрольной крови инкубируют 15 минут со стандартным количеством тест-частиц (обычно грамположительных кокков).
  2. Из каждой пробы готовят мазки, фиксируют и окрашивают (метиленовым синим или по Романовскому — Гимзе).
  3. Подсчитывают число фагоцитированных частиц в 100 фагоцитах, находят фагоцитарные числа для обеих проб и вычисляют ОИ.

Опсоно-фагоцитарный индекс (ОФИ), в отличие от ОИ, отражает состояние опсонических свойств, вызванных специфическими антителами и комплементом, а также фагоцитарную активность лейкоцитов больного к конкретному возбудителю. Методика его постановки и учёта при разных заболеваниях различна (визуальная, культуральная, изотопная).

Пример визуального метода определения ОФИ:

  1. В пробирку с 0,25 мл 2% раствора цитрата натрия добавляют 0,5 мл крови больного и 0,25 мл гретой суточной агаровой культуры возбудителя плотностью 1 млрд/мл (по стандарту мутности).
  2. Смесь инкубируют 30 минут при 37 °C.
  3. Далее поступают так же, как при определении ОИ.

Титр опсонинов (ТО) количественно характеризует силу опсонической активности сыворотки по отношению к специфическому возбудителю. В отличие от ОФИ, здесь исключается влияние изменений со стороны фагоцитов больного, так как в опыте используют лейкоциты или макрофаги здорового человека.

Клиническое применение и оценка

В клинической практике показатели опсонинов определяют при бруцеллёзе, коклюше, дифтерии, риккетсиозах. Однако суждение о диагностической ценности этих тестов исторически было противоречивым, что в основном было вызвано их трудоёмкостью, несовершенством методик и слабым соответствием современным (на момент создания текста) представлениям о сложном процессе опсонизации.

Современный контекст

Сегодня понятие «опсонины» расширилось. К ним относят не только антитела (IgG, IgM) и компоненты комплемента (C3b, C4b), но и другие белки плазмы, такие как C-реактивный белок (CRP), маннозо-связывающий лектин (MBL) и фибронектин.

Лабораторная диагностика сместилась в сторону более точных и автоматизированных методов:

  • Проточная цитометрия позволяет напрямую оценивать фагоцитоз и опсонизацию с использованием флуоресцентно меченых бактерий или частиц.
  • Иммуноферментный анализ (ИФА) и другие иммунологические методы используются для количественного определения специфических опсонизирующих антител или продуктов активации комплемента.
  • Оценка функциональной активности комплемента (CH50, AP50) даёт интегральное представление об этом ключевом компоненте опсонизации.

Таким образом, классические тесты (ОИ, ОФИ) в их первоначальном виде имеют в основном историческое значение. Современная оценка опсонической функции является частью комплексного исследования иммунного статуса и использует более специфичные и воспроизводимые технологии.