Малонатный тест
Малонатный тест — это биохимическая реакция, основанная на способности микроорганизмов ферментировать малонат натрия. Тест применяется для дифференциации бактерий семейства Enterobacteriaceae.
Принцип метода: В состав специальной питательной среды входит малонат натрия в качестве единственного или основного источника углерода. Способность бактерии утилизировать малонат приводит к защелачиванию среды, что регистрируется по изменению цвета кислотно-основного индикатора — бромтимолового синего.
Состав среды (на 1 литр дистиллированной воды):
- Дрожжевой экстракт — 1 г
- Сульфат аммония — 2 г
- Дигидрофосфат калия (однозамещённый фосфат калия) — 0,4 г
- Гидрофосфат калия (двузамещённый фосфат калия) — 0,6 г
- Хлорид натрия — 2 г
- Глюкоза — 5 г
- Малонат натрия — 3 г
- Бромтимоловый синий — 0,025 г
Подготовка и проведение теста:
- Компоненты растворяют в воде.
- Устанавливают pH среды на уровне 6,7.
- Среду разливают по пробиркам и стерилизуют в автоклаве в течение 15 минут при температуре 121 °C.
- Исследуемую чистую культуру бактерий засевают в среду.
- Посевы инкубируют при 37 °C. Результат учитывают в течение 14 дней.
Интерпретация результатов:
- Положительная реакция (ферментация малоната): Исходный жёлто-зелёный цвет среды изменяется на синий (голубой) из-за защелачивания.
- Отрицательная реакция (отсутствие ферментации): Цвет среды становится жёлтым или остаётся жёлто-зелёным.
Современный контекст
Малонатный тест, наряду с другими биохимическими тестами (например, IMViC), традиционно входит в набор методов для идентификации энтеробактерий. Однако в современной клинической и микробиологической практике его использование сокращается. Широкое внедрение автоматизированных систем идентификации (таких как VITEK, MALDI-TOF MS) и методов молекулярной диагностики (ПЦР, секвенирование) позволяет определять вид микроорганизма быстрее и точнее. Тем не менее, малонатный тест остаётся полезным и экономичным методом в учебных лабораториях и для первичной дифференциации в условиях ограниченных ресурсов.