Агар (агар-агар)
Агар, или агар-агар, — это природный продукт, получаемый из определённых видов красных морских водорослей (например, из родов Gracilaria и Gelidium). Он широко используется в качестве уплотнителя (гелеобразователя) питательных сред в микробиологии и как желирующий агент в пищевой промышленности.
Физические свойства:
- Внешний вид — желтовато-белый порошок, гранулы или полупрозрачные пластинки.
- Образует термообратимый гель: расплавляется при нагревании и застывает при охлаждении.
Химический состав:
Агар представляет собой сложный полисахарид. Его основные компоненты:
Полисахариды (70–80%): В их состав входят D- и L-галактоза, 3,6-ангидрогалактоза, пентозы, а также D-глюкуроновая и пировиноградная кислоты.
Вода (10–20%)
Минеральные соли (1,5–4%)
Из агара может быть выделена высокоочищенная фракция — агароза, которая является основным компонентом гелей для электрофореза ДНК и белков.
Ключевые свойства для микробиологии:
- Инертность: Большинство микроорганизмов не способны расщеплять агар, поэтому он не изменяет питательную ценность сред и сохраняет их стабильность.
- Требования к качеству: Неочищенный агар может содержать примеси (соли, пигменты), которые приводят к образованию неоднородного геля и даже ингибируют рост микробов. Для бактериологических и иммунологических работ необходимо использовать осветлённый агар высшего или первого сорта, очищенный методом вымораживания, с плотностью геля не ниже 320 г/см³.
Приготовление геля:
Агаровый гель формируется в процессе растворения порошка в воде при нагревании с последующим охлаждением.
- Смесь агара с водой кипятят или автоклавируют при 115–120 °C в течение 15 минут для полного растворения.
- Раствор охлаждают до 45–48 °C (температура, при которой он остаётся жидким, но уже не обжигает) и затем разливают для застывания.
Типичные концентрации в средах:
- Плотные питательные среды: 1,5–3% (масса/объём).
- Полужидкие (полутвёрдые) среды: 0,3–0,7% (масса/объём).
Другие применения:
Помимо приготовления питательных сред, агар (и особенно агароза) применяется в биохимических и иммунологических методах:
- Иммунодиффузия (реакция преципитации в геле).
- Иммуноэлектрофорез для разделения и идентификации антигенов.
