Ген PRNP у диких животных Тибетского нагорья: первое описание
Тибетская антилопа (Pantholops hodgsonii), голубой баран (Pseudois nayaur) и пищуха (Ochotona curzoniae) — дикие животные, обитающие на Цинхай-Тибетском нагорье. О естественных случаях трансмиссивных губкообразных энцефалопатий (TSE) у них не сообщалось, а их гены PRNP ранее не были описаны.
В исследовании, опубликованном в Zoonoses, были секвенированы гены PRNP 21 тибетской антилопы, 4 голубых баранов и 3 пищух, после чего были получены рекомбинантные белки. Используя штаммы скрепи (263K, 139A, ME7 и S15) в качестве "затравки", реактивность белков PrP овцы (rSheepPrP25-234) и пищухи (rPikaPrP23-230) проверили с помощью метода RT-QuIC. Также провели тесты PMCA на гомогенатах мозга домашних овец и кроликов с затравкой штаммов 263K и ME7.
Результаты
Гены PRNP:
- У полорогих (антилопа, баран) ген имеет длину 771 п.н. и кодирует 256 аминокислот (а.к.), показывая 100% гомологию с последовательностью дикого типа PrP овцы.
- У пищухи ген длиной 759 п.н. кодирует 252 а.к., демонстрируя 92,1% гомологии с последовательностью домашнего кролика.
Тесты RT-QuIC: Белки овцы и пищухи показали положительную реакцию в разведениях затравки до 10-5. Только белок пищухи (rPikaPrP23-230) дал положительные кривые в разведении 10-7.
Тесты PMCA: Не смогли генерировать устойчивый к протеиназе K PrP (PrPres).
Выводы
Это первое описание генов PRNP и аминокислотных последовательностей PrP тибетской антилопы, голубого барана и пищухи с Цинхай-Тибетского нагорья. В присутствии прионных штаммов грызунов PrP овцы и пищухи эффективно индуцируют фибрилляцию в RT-QuIC, но не генерируют PrPres в PMCA.
Результаты указывают, что пищуха, как важное звено биологической цепи нагорья, может играть значительную роль в циркуляции прионов. PrP пищухи заслуживает дальнейшего анализа из-за потенциальной ценности для диагностики прионных болезней человека.