Новый метод повышает эффективность редактирования генома CRISPR-Cas9

Эффективность инструментов редактирования генома CRISPR, нацеленных на нужный участок с помощью нуклеаз Cas9, сильно варьируется. Новая стратегия CMP-фьюжна, названная CRISPR-chrom, повышает активность в несколько раз. CRISPR-chrom работает за счет слияния Cas9 с хроматин-модулирующими пептидами (CMPs), как описано в статье, опубликованной в The CRISPR Journal.

В статье "Improving CRISPR-Cas9 Genome Editing Efficiency by Fusion with Chromatin-Modulating Peptides" Фуцян Чэнь и команда исследователей из MilliporeSigma (Сент-Луис, Миссури) сообщают о методах, которые они использовали для модификации Cas9 пептидами, известными своим естественным взаимодействием с хроматином — комплексом ДНК/РНК/белков, из которого состоят хромосомы. Исследователи демонстрируют значительное увеличение активности CRISPR-Cas9 со стратегией CRISPR-chrom, особенно на ранее труднодоступных для редактирования участках. Они также не обнаружили заметного увеличения нецелевых эффектов (off-target). Авторы также предоставили доказательство концепции этого подхода, используя белки Cas9, ортогональные популярному SpyCas9, что дополнительно расширяет CRISPR-инструментарий и открывает новые возможности для мультиплексирования.

«Это значительное техническое улучшение для расширенного CRISPR-инструментария, — говорит Родольф Баррангу, доктор философии, главный редактор The CRISPR Journal. — Этот подход улучшает результат редактирования на рефрактерных сайтах, а CRISPR-chrom в сочетании с улучшенными направляющими конструкциями увеличивает нашу способность гибко нацеливаться на геном».

2019-02-21