Реплик метод

Реплик метод — это способ выявления и изоляции мутантов в бактериальных популяциях, растущих в неселективных средах (условиях). Для этого культуру исследуемого микроба на плотной питательной среде с помощью штампа-репликатора, изготовленного соответственно размерам чашки из бархата или вельвета, переносят на селективную среду, например, содержащую антифаговую сыворотку, стрептомицин и другие агенты. На таких средах вырастают только мутанты.

Способ определения чувствительности бактерий к антибиотикам и антисептикам. Молодые бульонные культуры наливают в лунки крышки штампа-репликатора и посредством репликатора с 25–50 штифтами перемещают на плотные питательные среды с разными концентрациями антибиотиков или других веществ. Учёт ведут по наличию или отсутствию бактериального роста на местах реплик. Способ позволяет в одинаковых условиях сразу устанавливать чувствительность 25–50 штаммов бактерий. Для дифференциации биостатического действия от бактерицидного таким же штампом делают ререплику на среду без антибиотика. Отсутствие роста на ререпликах указывает на биоцидное действие, наличие роста — на биостатическое.

Способ установления способности бактерий к разложению сахаров и других органических соединений. Молодую бульонную культуру разливают в лунки, переносят репликатором на чашки с субстратом и индикатором и после инкубации учитывают изменение цвета среды в местах реплик.

Современный контекст

Метод реплик, или репликационного посева, остаётся классическим и широко используемым инструментом в микробиологии и генетике. Он был усовершенствован с появлением автоматических репликаторов и роботизированных систем, что позволяет работать с сотнями и тысячами колоний одновременно (например, в скрининговых исследованиях или при создании библиотек мутантов). В генетике он является основой для скрининга условно-летальных мутаций, а в клинической микробиологии — для быстрого определения профиля антибиотикорезистентности. Термин «ререплика» сегодня чаще заменяется на «контрольный перенос» или «реплика на контрольную среду».