Лептоспирозы

Лептоспирозы — это острые инфекционные заболевания, протекающие с лихорадкой. Их вызывают бактерии вида Leptospira interrogans. Болезнь поражает человека, а также многочисленные виды млекопитающих и птиц и распространена повсеместно.

Источник инфекции и пути заражения

Резервуаром возбудителя в природе и источником инфекции для человека служат домашние и дикие животные. Заражение человека чаще всего происходит через инфицированную воду (при купании, употреблении) или при прямом контакте с мочой больных животных.

Клиническая картина

Заболевание протекает со спирохетемией (наличием возбудителя в крови). Клиническая картина полиморфна и варьирует от лёгких лихорадочных форм без желтухи до тяжёлых форм, для которых характерны:

Тяжёлые формы чаще вызывают серовары L. icterohaemorrhagiae и L. canicola. Более доброкачественное течение обычно ассоциировано с сероварами L. grippotyphosa, L. pomona, L. hebdomadis и другими.

Микробиологическая диагностика

Для лабораторной диагностики лептоспирозов используют главным образом культуральный (в первую неделю болезни) и серологический (со второй недели) методы.

Культуральный метод (выделение возбудителя)

  1. Материал (кровь, ликвор, гомогенат органов) в объёме 1–2 мл засевают в несколько пробирок с жидкой питательной средой (водно-сывороточной или фосфатно-сывороточной).
  2. Пробирки инкубируют при 28 °C, 37 °C или комнатной температуре около 3 недель. Для предупреждения высыхания среды пробирки закрывают резиновыми пробками или на среду наливают тонкий слой стерильного вазелинового масла.
  3. Рост проверяют каждые 3–5 дней с помощью темнопольной микроскопии «раздавленной капли» (визуально, невооружённым глазом, рост лептоспир не обнаруживается).
  4. На основании микроскопии (характерная морфология и движение) можно предварительно отнести выделенный микроб к роду Leptospira.
  5. Окончательную идентификацию до серовара проводят в реакции агглютинации-лизиса с типоспецифическими сыворотками.

Серологический метод (обнаружение антител)

Для обнаружения специфических антител, которые появляются со второй недели болезни, используют реакцию микроагглютинации-лизиса (РМАЛ). Диагностическим считается титр 1:100 и выше.

  1. Из прогретой исследуемой сыворотки готовят 5–6 двукратных разведений, начиная с 1:50.
  2. Разведения распределяют по 2–3 капли в несколько рядов панели для серологических реакций.
  3. В каждый ряд добавляют по 2–3 капли взвеси живых молодых культур типовых штаммов лептоспир (плотность около 50 клеток в поле зрения микроскопа).
  4. Смесь выдерживают 1 час при 37 °C или 25 °C, после чего результат учитывают под тёмным полем микроскопа.
  5. За титр принимают последнее разведение сыворотки, при котором в поле зрения наблюдается несколько активно движущихся агглютинатов («жучков»).

Биологическая проба

В случаях исследования материала, контаминированного посторонней микрофлорой (моча, вода, почва), используют заражение лабораторных животных (молодых морских свинок) внутрибрюшинно или через скарификацию на подушечках лапок. На первой неделе после заражения делают посев крови животного, в конце второй — ставят РА-лизис с типовыми штаммами.

Прямая микроскопия

Прямая микроскопия крови и мочи человека из-за малого количества лептоспир в этих материалах редко даёт положительные результаты. Более эффективен этот метод при исследовании мочи животных.