Ученые предложили надежную стратегию мечения вируса для визуализации инфекции EV71
Исследователи под руководством профессора Цай Линьтао из Шэньчжэньского института передовых технологий (SIAT) Китайской академии наук предложили новую стратегию мечения вируса на основе биосинтеза белка для динамической визуализации инфекции, вызываемой безоболочечным энтеровирусом 71 (EV71). Исследование опубликовано в ACS Applied Materials & Interfaces.
EV71 — основная причина тяжелой формы ящура (HFMD), которая может перерасти в серьезные и опасные для жизни неврологические осложнения, такие как энцефалит ствола мозга, менингит и паралич, подобный полиомиелиту. Понимание пути вирусной инвазии EV71 важно для выяснения его патогенеза.
Хотя для отслеживания вирусной инфекции в клетках-хозяевах и in vivo применялись методы генной инженерии и химического сшивания, эти стратегии потенциально могли влиять на пути вирусной инвазии.
Новая стратегия может быть использована для точного анализа пути инвазии EV71, особенно для выяснения процесса раздевания вирусной РНК.
Исследователи обнаружили, что L-азидогомоаланин (Aha), азидопроизводное метионина, был эффективнее азидосахаров во внедрении азидных групп в капсидные белки вируса путем замещения остатков метионина во время биосинтеза и сборки вирусных белков.
«Затем азид-модифицированные частицы EV71 эффективно метятся флуоресцентными зондами, функционализированными дибензоциклооктилом, с помощью in situ биоортогональной реакции с хорошо сохраненной вирусной инфекционностью», — сказал профессор Цай.
«Двойное мечение и визуализация четко показывают, что вирионы EV71 в первую очередь связываются с рецепторами-мусорщиками и интернализуются через клатрин-опосредованный эндоцитоз. Затем вирусные частицы транспортируются в ранние и поздние эндосомы, где вирусная РНК высвобождается pH-зависимым образом примерно через 70 минут после заражения», — добавил он.
Это исследование является важной вехой в изучении энтеровирусной инфекции. Оно четко показало клатрин-опосредованный эндоцитоз и процессы раздевания EV71, особенно пространственно-временную динамику вирусной инфекции в клетках-хозяевах.
Эти результаты могут сыграть важную роль в раскрытии пути инвазии и патогенеза инфекции EV71.