Окраска по Леффлеру

Способ метахроматического окрашивания, используемый в микробиологии для выявления волютиновых (метахроматических) зёрен у коринебактерий (Corynebacterium), а также скоплений нуклеиновых соединений у других бактерий.

Методика:

  1. На фиксированный мазок наносят щелочной раствор метиленового синего (см. Красители).
  2. Краситель оставляют на 3 — 5 минут.
  3. Препарат аккуратно промывают водой.
  4. Мазок высушивают и исследуют под микроскопом.

Результат окрашивания:

  • Протоплазма (цитоплазма) бактериальных клеток окрашивается в голубой цвет.
  • Волютиновые зёрна, состоящие в основном из полифосфатов, окрашиваются в тёмно-синий (фиолетовый) цвет за счёт метахромазии — способности некоторых красителей менять цвет при связывании с определёнными субстратами.

Современный контекст

Метод окраски по Леффлеру, разработанный Фридрихом Леффлером в конце XIX века, остаётся классическим и достаточно простым способом предварительной идентификации коринебактерий, в частности возбудителя дифтерии (Corynebacterium diphtheriae). Волютиновые зёрна, выявляемые этим методом, располагаются на полюсах клетки, придавая им характерный вид «булавы» или «китайских иероглифов». В современной лабораторной диагностике этот метод часто используется в комбинации с другими — биохимическими, иммунологическими и молекулярно-генетическими (например, ПЦР) — для точной видовой идентификации и определения токсигенности штаммов.