Окраска по Леффлеру
Способ метахроматического окрашивания, используемый в микробиологии для выявления волютиновых (метахроматических) зёрен у коринебактерий (Corynebacterium), а также скоплений нуклеиновых соединений у других бактерий.
Методика:
- На фиксированный мазок наносят щелочной раствор метиленового синего (см. Красители).
- Краситель оставляют на 3 — 5 минут.
- Препарат аккуратно промывают водой.
- Мазок высушивают и исследуют под микроскопом.
Результат окрашивания:
- Протоплазма (цитоплазма) бактериальных клеток окрашивается в голубой цвет.
- Волютиновые зёрна, состоящие в основном из полифосфатов, окрашиваются в тёмно-синий (фиолетовый) цвет за счёт метахромазии — способности некоторых красителей менять цвет при связывании с определёнными субстратами.
Современный контекст
Метод окраски по Леффлеру, разработанный Фридрихом Леффлером в конце XIX века, остаётся классическим и достаточно простым способом предварительной идентификации коринебактерий, в частности возбудителя дифтерии (Corynebacterium diphtheriae). Волютиновые зёрна, выявляемые этим методом, располагаются на полюсах клетки, придавая им характерный вид «булавы» или «китайских иероглифов». В современной лабораторной диагностике этот метод часто используется в комбинации с другими — биохимическими, иммунологическими и молекулярно-генетическими (например, ПЦР) — для точной видовой идентификации и определения токсигенности штаммов.
