Метод двухцветной визуализации рецепторов на живых клетках

Исследователи разработали новый метод маркировки и визуализации клеточных поверхностных рецепторов в реальном времени с помощью двух цветов.

Суть метода

В отличие от стандартных методов микроскопии живых клеток, где к рецептору присоединяют крупные флуоресцентные белки, в новом подходе в рецепторе заменяют всего две аминокислоты на неканонические аминокислоты. Эти синтетические "строительные блоки" выступают в роли химических "ручек", каждая из которых совместима с разным флуоресцентным красителем, с использованием биоортогональной химии.

Возможности метода

• Позволяет установить два различающихся по цвету красителя практически в любую позицию рецептора на живых клетках.
• Флуоресцентные анализы могут показывать не только локализацию рецептора, но и сообщать о конформационных изменениях, участвующих в восприятии окружающей среды и передаче сигналов внутрь клетки.

Значение для исследований

Многие рецепторы, например, большое семейство G-белок-сопряжённых рецепторов (GPCR), являются важными мишенями для лекарств. До сих пор механистическое понимание действия препаратов на эти рецепторы в основном получали на очищенных рецепторах в условиях in vitro. Новый метод, успешно продемонстрированный командой на GPCR и рецепторе Notch, расширяет возможности для изучения естественного поведения и фармакологии рецепторов в их нативной среде — в мембране живых клеток.

Исследование опубликовано в журнале Cell Reports.