Фенилаланиндезаминаза

Фенилаланиндезаминаза — фермент, катализирующий реакцию дезаминирования аминокислоты фенилаланина с образованием фенилпировиноградной кислоты. Этот фермент продуцируется бактериями рода Proteus, что используется в микробиологической практике для их дифференциации от других энтеробактерий.

Метод исследования основан на обнаружении фенилпирувата в среде после роста культуры. Для этого используют специальную питательную среду.

Приготовление среды:

• К 1 л 1–2% мясо-пептонного агара (МПА) добавляют:
  • 9 г дрожжевого экстракта,
  • 1 г фенилаланина,
  • 1 г двузамещённого фосфата натрия (Na₂HPO₄),
  • 5 г хлорида натрия (NaCl).
• Смесь разливают в пробирки, стерилизуют при 112 °C в течение 30 минут и скашивают.

Ход анализа:

1. Исследуемую культуру засевают на поверхность скошенной среды штрихом.
2. После инкубации (обычно в течение суток) на выросшую культуру наносят несколько капель 10% раствора хлорида железа (FeCl₃).
3. В положительном случае, при наличии фермента, вокруг линии роста появляется зелёное окрашивание, обусловленное образованием комплекса фенилпирувата с ионами железа.