Нитратов восстановление (редукция)

Процесс восстановления нитратов (NO₃⁻) до нитритов (NO₂⁻), который может продолжаться дальше — до образования аммонийных солей (NH₄⁺). Эта биохимическая способность характерна для многих бактерий и используется в микробиологии для их идентификации.

Методика определения:

Для установления способности к восстановлению нитратов исследуемую культуру засевают в 0.5% пептонную воду с добавлением нитрата калия (KNO₃) в концентрации 0.2%. Важно, чтобы исходная среда и нитраты не содержали примесей нитритов.

После 4-суточной инкубации в пробирку добавляют по 0.5 мл двух реактивов:

  1. 0.8% раствор сульфаниловой кислоты в 5н. уксусной кислоте.
  2. 0.6% раствор α-нафтиламина в 5н. уксусной кислоте.

Интерпретация результатов:

  • Появление красного окрашивания среды указывает на присутствие нитритов, то есть на неполное восстановление нитратов исследуемым микроорганизмом.
  • Отсутствие окрашивания может иметь две причины:
    1. Микроб не способен восстанавливать нитраты.
    2. Микроб полностью восстановил нитраты через стадию нитритов до аммонийных солей.

Для дифференциации этих случаев в пробирку добавляют немного порошка цинка, который химически восстанавливает нитраты до нитритов.

  • Появление красного цвета после добавления цинка свидетельствует, что нитраты в среде присутствовали, но микроб их не восстанавливал.
  • Отсутствие окраски после добавления цинка подтверждает, что микроб способен к полному восстановлению нитратов до аммонийных солей, так как нитратов в среде уже не осталось.