Коагулаза бактерий (плазмокоагулаза)
Группа бактериальных протеиназ, способных свертывать плазму крови животных. Относится к ферментам патогенности, то есть факторам, повышающим способность микроорганизма вызывать заболевание.
Коагулаза неоднородна по нескольким признакам:
- Локализации: может быть свободной (экстрацеллюлярной) или связанной с клеткой.
- Спектру действия: активность к плазме разных видов животных.
- Продуцентам: вырабатывается определёнными видами бактерий.
- Антигенной специфичности.
Например, золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus) синтезирует как свободную (обнаруживается в культуральной жидкости), так и клеточную коагулазу. Клеточная форма локализована на внешней мембране бактерии и в жидкой среде отсутствует.
Механизм действия:
- Свободная коагулаза реагирует с кофактором плазмы (протромбином), образуя комплекс «коагулазотромбин». Этот комплекс превращает фибриноген в фибрин, что приводит к образованию сгустка.
- Клеточная коагулаза свертывает плазму напрямую, без участия кофактора.
Стафилококковая коагулаза наиболее активна в отношении плазмы человека и кролика, менее активна к плазме других видов. In vitro (в пробирке) её активность подавляется различными химическими веществами, особенно окислителями, а также некоторыми антибиотиками, включая пенициллин.
Методы определения коагулазы
Определение клеточной (связанной) коагулазы (плазмо-коагулазная реакция на стекле)
На предметное стекло наносят каплю густой суспензии исследуемой культуры и смешивают её с каплей (петлёй) цельной цитратной плазмы кролика или человека. В положительном случае через несколько секунд образуется видимый сгусток. Одновременно ставят заведомо положительный и заведомо отрицательный контроль.
Определение свободной коагулазы (пробирочный тест)
В ряд пробирок с 1 мл цитратной плазмы кролика или человека (цельной и разведённой физиологическим раствором в 2 и 4 раза) вносят по петле 18–24-часовой агаровой культуры. Смесь вместе с контролями инкубируют при 37 °C и наблюдают за появлением сгустка через 2, 4 и 18 часов. Дальнейшая инкубация уже свернувшейся плазмы может привести к растворению (лизису) сгустка, что свидетельствует о фибринолитической активности исследуемой культуры.
Важно: для постановки проб на коагулазу не подходит гепаринизированная или профильтрованная плазма.
