Бактериолиза реакция

Реакция бактериолиза — это иммунологическая реакция взаимодействия цельных бактериальных клеток с антителами к ним и комплементом, в результате которой происходит лизис (растворение) бактерий. Литическими свойствами обладают иммунные сыворотки при таких заболеваниях, как:

Лизис лептоспир и некоторых других микробов может происходить без участия комплемента.

Постановка реакции in vitro

Для проведения реакции в пробирке смешивают:

  1. 0,1 мл взвеси стандартной культуры бактерий плотностью 250 млн/мл.
  2. 0,4 мл исследуемой сыворотки, инактивированной прогреванием при 56 °C в течение 30 минут.
  3. 0,1 мл комплемента.

В контрольную пробирку вместо иммунной сыворотки добавляют такой же объём нормальной сыворотки. Пробирки помещают в термостат на 2 часа при 37 °C, после чего делают количественный высев на чашки Петри с плотной питательной средой из опытной и контрольной пробирок. Посевы на сутки ставят в термостат. О содержании и концентрации лизинов в исследуемой сыворотке судят по разнице в числе выросших колоний в опыте и контроле.

Постановка реакции in vivo

Реакцию проводят в пассивном и активном вариантах на морских свинках.

Активный вариант: Иммунным морским свинкам внутрибрюшинно вводят 1 мл взвеси исследуемой культуры. Спустя 10, 30 и 60 минут получают перитонеальный экссудат и исследуют его в придавленной капле и окрашенном водным фуксином мазке. Контролем служит неиммунная морская свинка.

Пассивный вариант: Опытной морской свинке внутрибрюшинно вводят смесь из 1 мл стандартной культуры бактерий и 0,2 мл исследуемой сыворотки. Контрольной свинке вводят смесь из бактерий и нормальной сыворотки. Учёт результатов осуществляют так же, как и в активном варианте.

Учёт результатов: В положительном случае в обоих вариантах в придавленной капле видны разные стадии бактериолиза: обездвиживание, разбухание и исчезновение бактерий. В мазках из экссудата контрольной свинки, а также при отрицательной реакции бактериолиза в ранние сроки бактерии не изменены. В поздние сроки происходит увеличение их количества, и животные могут погибнуть.