Универсальный метод связывает квантовые точки с белками
Квантовые точки становятся популярным инструментом для флуоресцентной метки биомолекул. Многоинституциональная группа исследователей под руководством Эми Блум из Военно-морской исследовательской лаборатории разработала простой универсальный метод контролируемого присоединения квантовых точек к белкам. Результаты опубликованы в журнале Nanotechnology.
Принцип метода основан на сильном связывании квантовых точек с короткими пептидами, содержащими аминокислоту гистидин, которые, в свою очередь, прочно связываются с участками белка, содержащими аминокислоту лизин.
Процедура метки:
- Коммерчески доступный пептид с гистидином смешивают с целевым белком (в работе использовали антитело и вирусную частицу).
- Добавляют водорастворимые квантовые точки на основе кадмий селенид/цинк сульфид.
- Смесь выдерживают при комнатной температуре два дня.
- Невступившие в реакцию квантовые точки удаляют с помощью гель-электрофореза (малые партии) или эксклюзионной хроматографии (крупные партии).
Результаты:
- Метод обеспечил равномерную и контролируемую метку вирусных частиц.
- Предотвратил образование агрегатов "квантовая точка–белок", характерных для других методов.
- В отличие от подходов, требующих генной инженерии белков для добавления гистидиновых "меток" (His-tag), новый метод использует готовые химические реагенты.
Сохранение функции белка — ключевой параметр. Эксперименты показали, что меченое антитело сохранило неизменную авидность (силу связывания) со своей мишенью по сравнению с немеченым.
Исследование под названием "Templated self-assembly of quantum dots from aqueous solution using protein scaffolds" проводилось с участием специалистов из Geo-Centers, Inc., Университета Джорджа Мейсона и Исследовательского института Скриппса.