Противостояние вирусу герпеса кои
Карп — одна из самых популярных промысловых рыб. Серьёзную угрозу для него представляет вирус герпеса кои (KHV). Он может месяцами находиться в рыбе в латентном состоянии, прежде чем разовьётся смертельная инфекция, — этого времени достаточно для заражения множества других особей в хозяйстве. Исследователи Fraunhofer совместно с партнёрами разработали метод, который поможет диагностировать вирус надёжнее и точнее.
Около половины всей рыбы сегодня поступает из аквакультуры. Карп — вторая по значимости после форели рыба для аквакультуры Германии. Болезнь, вызываемая KHV, является нотифицируемой. Во время вспышки в Саксонии с 2003 по 2005 год в некоторых хозяйствах погибли почти все особи; потери составили 28 тонн карпа.
Усовершенствованная диагностика с использованием клеточных культур
«Инфекцию KHV нельзя вылечить, поэтому важно максимально её предотвращать. Мы разработали улучшенную диагностику, позволяющую надёжно выявлять заражённых животных. Чем быстрее изолировать больных карпов, тем выше шанс защитить остальных рыб от KHV», — говорит доктор Себастьян Ракерс, руководитель рабочей группы по водной клеточной технологии и аквакультуре в исследовательском учреждении Fraunhofer EMB.
Ранее вирус герпеса кои выявляли с помощью ПЦР-тестов, которые делали вирусную ДНК видимой в образце ткани. «Однако если в образце недостаточно вирусной ДНК, ПЦР даёт ложноотрицательные результаты». Ещё один существенный недостаток ПЦР-тестов: они не позволяют сделать вывод об инфекционности вируса, поскольку наличие генома не обязательно означает обнаружение репродуцируемого вируса.
«С помощью наших усовершенствованных и частично новых методов с использованием клеточных культур мы можем определить, сколько вирусных частиц приходится на клетку, — а значит, и насколько активно вирус реплицируется в клетках». Таким образом, клеточные культуры служат не только дополнительным диагностическим инструментом, но и помогают лучше понять вирус.
Разработка вакцины продвигается успешно
Команде Ракерса удалось вырастить клеточные культуры, которые могут реплицировать значительно больше вирусов на клетку, чем традиционные культуры. «До сих пор лучший возможный титр — количество инфекционных вирусов на миллилитр, необходимое для гибели половины клеток, — составлял 106. Нам удалось повысить вирусный титр до 108, и с помощью дальнейшей оптимизации мы надеемся достичь титра 1010».
Это важно не только для улучшенной диагностики, но и является предпосылкой для разработки высокоэффективной вакцины против KHV. «Наши партнёры по проекту из Института Фридриха Лёффлера (FLI), кафедры биопроцессной инженерии Университета Фридриха-Александра в Эрлангене-Нюрнберге и Ганноверского университета ветеринарной медицины активно работают над разработкой вакцины и уже смогли значительно снизить смертность в азиатской линии KHV».