Титр вируса
Титр вируса — это количественная мера, определяющая концентрацию вирусных частиц в исследуемом образце. Существует два основных подхода к его определению, которые дают разную информацию:
- Физический (общий) титр — это общее количество вирусных частиц (вирионов) в единице объёма, обычно в 1 мл суспензии. Его подсчитывают напрямую, например, с помощью электронной микроскопии. Этот метод выявляет все вирионы, включая неинфекционные (дефектные).
- Инфекционный титр — это количество именно
инфекционных, то есть способных к размножению, вирусных единиц в 1 мл
суспензии. Его определяют биологическими методами:
- Метод бляшек: вирус вносят в монослой культуры клеток; каждая инфекционная частица образует зону поражения (бляшку).
- Метод конечных разведений: материал последовательно разводят (обычно в 10 раз) и вносят в чувствительные тест-системы (культуры клеток, куриные эмбрионы, лабораторных животных). Титром вируса считают наибольшее разведение, которое ещё вызывает специфическое поражение (локальное или общее) тест-объекта.
В обоих случаях титр вируса принято выражать в виде десятичного логарифма (например, lg ЛД₅₀/мл или lg БОЕ/мл).
Современный контекст
Сегодня для определения вирусного титра, помимо классических методов, широко используются молекулярные техники, такие как количественная ПЦР (qPCR). Она позволяет с высокой точностью измерить количество вирусной нуклеиновой кислоты (геномных копий) в образце. Однако важно помнить, что qPCR определяет геномный эквивалент, а не обязательно инфекционную активность. Поэтому для оценки именно инфекционного потенциала вируса биологические методы (метод бляшек, TCID₅₀) по-прежнему остаются «золотым стандартом». Современные протоколы часто требуют сопоставления данных, полученных разными методами.
