Цианидный тест (KCN-тест)

Цианидный тест, или KCN-тест, — это микробиологическая проба, определяющая устойчивость бактерий к солям цианистой кислоты (цианидам). Метод традиционно используется для дифференциации бактерий семейства Enterobacteriaceae (энтеробактерий).

Принцип и методика проведения

Тест основан на способности некоторых бактерий расти в присутствии цианида калия (KCN), который является мощным ингибитором дыхательной цепи.

Для постановки теста применяется специальная жидкая среда следующего состава (на 100 мл дистиллированной воды):

  • Пептон — 0,3 г
  • Хлорид натрия (NaCl) — 0,5 г
  • Дигидрофосфат калия (KH₂PO₄) — 0,0225 г
  • Гидрофосфат натрия (Na₂HPO₄) — 0,564 г

Порядок приготовления и проведения:

  1. Указанные ингредиенты растворяют в воде.
  2. Устанавливают pH среды на уровне 7,6.
  3. Среду стерилизуют автоклавированием.
  4. После охлаждения стерильно добавляют 1,5 мл 0,5% раствора цианида калия (KCN).
  5. Готовую среду разливают по 1 мл в стерильные пробирки.
  6. Исследуемую культуру засевают бактериологической петлей.
  7. Пробирки инкубируют при 37 °C в течение 24 — 48 часов.

Учёт результатов:

  • Положительный тест (устойчивость): наличие видимого роста бактерий и помутнения среды.
  • Отрицательный тест (чувствительность): отсутствие роста, среда остаётся прозрачной.

Меры предосторожности

Цианид калия — чрезвычайно токсичное для человека соединение. Работа с ним требует строгого соблюдения правил техники безопасности в лаборатории. После учёта результатов теста среду, содержащую цианид, необходимо обязательно обезвредить (например, путём обработки щелочным раствором перманганата калия или гипохлорита) перед утилизацией.

Современный контекст

В современной клинической микробиологии классический цианидный тест используется редко, так как он трудоёмок и связан с работой с высокотоксичным реактивом. Для идентификации энтеробактерий и других микроорганизмов широко применяются автоматизированные и миниатюризированные системы (например, API, VITEK, MALDI-TOF масс-спектрометрия), которые являются более быстрыми, безопасными и позволяют получить комплексный биохимический профиль бактерии. Однако принцип теста (определение устойчивости к цианиду) может быть включён в состав таких мультитест-систем в виде отдельных биохимических ячеек.