Бактериофагов выделение

Бактериофаги обнаруживаются во внешней среде (вода, почва, пищевые продукты), в выделениях людей и животных, а также в популяциях бактерий, заражённых фагом.

Процесс выделения бактериофагов состоит из нескольких этапов:

1. Предварительная очистка. Исследуемый материал сначала освобождают от крупных частиц. Для этого применяют центрифугирование при 1000 — 1500 об/мин в течение 15 — 20 минут или фильтрование через бумажный фильтр.
2. Удаление бактерий. Затем из полученного фильтрата или надосадочной жидкости удаляют бактериальные клетки. Это делают, пропуская жидкость через бактериальные фильтры № 2 или № 3. Альтернативный метод освобождения от живых бактерий включает:
   • Прогревание материала.
   • Обработку хлороформом (1 — 2 капли на 10 мл) с последующей выдержкой при комнатной температуре в течение 1 — 2 часов.
   • Заключительное центрифугирование.
3. Обнаружение фага. Полученный надосадок или фильтрат проверяют на присутствие фага. Для этого используют метод нанесения капель на газон чувствительной культуры бактерий или метод агаровых слоёв.

Для выделения фага из лизогенных культур бактерии выращивают в оптимальных условиях до фазы логарифмического роста, после чего обрабатывают и исследуют описанными выше методами.