Клонирование из капли крови
За последние десятилетия учёные использовали мощный арсенал методов биотехнологии для создания множества генетически модифицированных линий мышей. Эти животные представляют собой бесценный ресурс для изучения развития млекопитающих и болезней, но многие из этих линий бесплодны или их сложно разводить обычными методами. Ацуо Огура и его коллеги из Центра биоресурсов RIKEN разработали упрощённую стратегию клонирования, которая должна облегчить учёным сохранение их кропотливо созданных линий мышей.
«Мы проводим эксперименты по переносу ядра соматической клетки для сохранения ценных генетических ресурсов мышей», — объясняет Огура. Перенос ядра соматической клетки (SCNT) — стандартная техника клонирования млекопитающих, при которой ядро из интересующей донорской клетки переносится в неоплодотворённую яйцеклетку, из которой удалено собственное ядро. Полученная клетка ведёт себя как оплодотворённая яйцеклетка и даёт начало клону донорского животного.
Огура исследовал возможность использования крови для получения ядер для SCNT как более простой и менее инвазивной процедуры забора донорских клеток. В качестве первоначального теста исследователи собрали капли крови из хвостов донорских животных и попытались получить клонов из различных подтипов клеток крови. Для сравнения они провели параллельные эксперименты SCNT с использованием кумулюсных клеток, которые обычно служат клетками поддержки для ооцита и часто используются в качестве доноров для клонирования.
Хотя успешность была в целом выше с кумулюсными клетками, Огура был рад обнаружить, что его команда смогла успешно получить клонов из двух различных типов клеток крови — гранулоцитов и лимфоцитов. «Клетки периферической крови, особенно гранулоциты, являются терминально дифференцированными клетками и имеют короткий срок жизни, — объясняет он. — Было удивительно, что они могут дать начало новой жизни с помощью переноса ядра». Команде Огуры удалось использовать SCNT на основе гранулоцитов для клонирования четырёх различных генетически модифицированных линий мышей. Эти первоначальные результаты указывают на то, что метод должен быть широко применим, и Огура предполагает, что он может даже помочь сохранить исчезающие виды в дикой природе.
Использование периферической крови предлагает заметные преимущества для клонирования по сравнению с забором других исходных тканей, который иногда может потребовать эвтаназии донорского животного. Хотя для спасения «исчезающих» линий мышей доступны другие, не-SCNT методы, такие подходы требуют жизнеспособных мужских половых клеток и поэтому не являются универсально применимыми. Сейчас приоритетом Огуры является повышение эффективности SCNT с периферической кровью, чтобы надёжность метода соответствовала его простоте.
