Новая методика характеристики иммунных клеток в легких для клинических испытаний
Исследователи из Института токсикологии и экспериментальной медицины Фраунгофера ITEM разработали процедуру характеристики иммунных клеток в легких с помощью чип-цитометрии. Этот метод позволяет хранить ценные образцы пациентов в холодильниках месяцами и исследовать их по новым параметрам, если в ходе испытаний возникают дополнительные вопросы.
Анализ образцов
Для анализа образцы пациентов (мокрота или бронхоальвеолярный лаваж) наносятся на специальный чип с прозрачной камерой. Клетки прикрепляются ко дну камеры и окрашиваются флуоресцентными антителами, специфичными к определенному типу иммунных клеток (например, гранулоцитам или макрофагам). Анализ микроскопических изображений в значительной степени автоматизирован.
Преимущества метода:
- Позволяет не только дифференцировать типы клеток, но и определять их активацию и подгруппы.
- Анализ автоматизирован, в отличие от ручного дифференциального подсчета клеток.
- Чипы можно хранить для повторного анализа, в отличие от проточной цитометрии, где образцы утилизируются.
Адаптация для легочных клеток
Метод был адаптирован для иммунных клеток легких, что сопряжено с трудностями:
- Клетки в мокроте часто предварительно активированы, что усложняет обработку.
- Легочные макрофаги значительно крупнее клеток крови.
В пилотном проекте исследователи вызвали воспаление у здоровых добровольцев с помощью ингаляции раздражителя. Чип-цитометрия выявила повышенное количество нейтрофильных гранулоцитов и моноцитов (клеток-предшественников макрофагов) в образцах, подтвердив возможность обнаружения и количественной оценки воспаления.
Применение при ХОБЛ
Одно из ключевых направлений исследований — оценка эффективности новых препаратов для лечения хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ). Технология хорошо подходит для мониторинга действия лекарств в ходе клинических испытаний. Институт выступает в качестве центральной лаборатории для многоцентровых исследований и хранит образцы в биобанке.