Микроскопия в фазово-контрастном микроскопе

Для фазово-контрастной микроскопии выпускают приставку Ф‑1 к световому микроскопу. В её состав входят:

  • Ахроматические фазовые объективы (Ф10×0,30; Ф20×0,40; Ф40×0,65; Ф90×1,25).
  • Револьверный фазовый конденсор с отдельной диафрагмой для каждого из фазовых объективов.
  • Вспомогательный микроскоп малого увеличения.

Этапы проведения фазово-контрастной микроскопии:

  1. В световом микроскопе устанавливают необходимые объектив и окуляр.
  2. Обычный конденсор заменяют на фазово-контрастный, установив его диафрагму в положение «О».
  3. На предметный столик помещают препарат и фокусируют его.
  4. Регулируют освещение до получения чёткого изображения нитей лампы на диафрагме конденсора, после чего диафрагму конденсора полностью открывают.
  5. Окуляр заменяют вспомогательным микроскопом, положение тубуса не меняют. Перемещением окуляра вспомогательного микроскопа фокусируют изображение фазового кольца объектива.
  6. Поворотом револьвера подбирают диафрагму, соответствующую используемому объективу. Наблюдая во вспомогательный микроскоп, с помощью центрировочных винтов совмещают изображения колец фазовой пластинки (тёмное) и кольцевой диафрагмы (светлое).
  7. Вспомогательный микроскоп заменяют рабочим окуляром и приступают к изучению препарата. Чаще всего для такого исследования используют тонкий нефиксированный и неокрашенный мазок взвеси бактерий на предметном стекле или агаровую пластинку с растущей культурой микроорганизмов.

Современный контекст

Описанная приставка Ф‑1 является классическим, но уже устаревшим решением. Современные фазово-контрастные микроскопы — это, как правило, интегрированные системы, где все необходимые компоненты (специальные объективы с фазовыми кольцами, конденсор с револьверной диафрагмой и часто встроенный телескоп для юстировки) конструктивно объединены. Процедура настройки (совмещения колец) остаётся схожей, но выполняется проще и быстрее. Фазово-контрастная микроскопия остаётся незаменимым методом для наблюдения живых, неокрашенных биологических объектов (клеток, микроорганизмов), позволяя изучать их внутреннюю структуру и динамику процессов без применения фиксаторов и красителей.