Новый биолюминесцентный иммуносенсор для количественного тестирования у постели больного
Исследователи из Научного института Токио разработали новый иммуносенсор на основе нанотел, который стабильно работает в неразбавленных биологических жидкостях и суровых условиях. Инновационный дизайн использует BRET (резонансный перенос энергии биолюминесценции) и демонстрирует большой потенциал для point-of-care тестирования (POCT), мониторинга терапевтических препаратов и экологических приложений с использованием бумажных устройств.
Проблема существующих технологий
Особенно перспективный класс гомогенных иммуносенсоров, известный как Quenchbodies (Q-bodies), излучает флуоресценцию в ответ на связывание антигена. Однако они имеют значительные ограничения:
- Не могут эффективно работать в неразбавленных биологических жидкостях (кровь, молоко).
- Их хранение и применение в бумажных устройствах для POCT остаются сложными.
Инновационное решение: BRET nano Q-body
Команда под руководством доцента Тэцуи Китагути создала новый тип Q-body, объединив:
- Нанотела — стабильные фрагменты антител, устойчивые к денатурации.
- NanoLuc — люцифераза, излучающая яркий синий свет.
- Флуоресцентный краситель TAMRA.
Принцип работы
- При связывании целевого антигена с нанотелом происходят структурные изменения.
- Краситель TAMRA перемещается ближе к ферменту NanoLuc.
- Это восстанавливает свечение TAMRA и облегчает перенос энергии (BRET).
- Цвет излучения меняется с синего (от NanoLuc) на красный (от TAMRA).
- Соотношение интенсивностей излучения двух цветов коррелирует с концентрацией антигена, что позволяет проводить точное количественное определение даже с помощью портативных устройств (например, смартфонов).
Ключевые преимущества
- Высокая стабильность: Устойчивость к нагреванию, органическим растворителям, восстановителям и детергентам благодаря структуре нанотел.
- Работа в биологических жидкостях: Эффективен в молоке, сыворотке и цельной крови без разбавления.
- Потенциал для POCT: Успешно протестирован в бумажных устройствах для измерения концентрации модели химиотерапевтического препарата.
«Бумажные устройства также работали корректно после длительного хранения без контроля температуры и в биологических жидкостях без разбавления, что делает их полезными для обнаружения у постели больного, в полевых и домашних условиях. Мы ожидаем, что бумажные платформы преобразуют методы in situ детекции в терапевтических, диагностических и экологических приложениях», — сказал Китагути.
Исследование, опубликованное 11 ноября 2024 года в ACS Sensors, демонстрирует, как комбинация инструментов аналитической биохимии может привести к созданию технологии, способной улучшить диагностику и мониторинг окружающей среды.
