Новая техника позволяет проникать сквозь жёсткую оболочку дрожжевых клеток

Биологи, изучающие дрожжи, долгое время не могли использовать микропипетки — крошечные иглы для прямой доставки веществ в клетку — из-за слишком прочной клеточной стенки дрожжей.

Исследователи из Рокфеллеровского университета Пол Нёрс и Даниэль Ривели (CNRS, Франция) разработали метод, решающий эту проблему. Они использовали крошечный электрический двигатель вместе с пипеткой, чтобы «пропилить» отверстие в жёсткой наружной оболочке клетки. Новая методика позволяет успешно вводить маркеры, такие как флуоресцентные белки, в дрожжи Schizosaccharomyces pombe, не убивая их.

Учёные используют не острый кончик микропипетки, а гибкую боковую сторону её наконечника, чтобы изогнуть клеточную стенку отдельной дрожжевой клетки, зафиксированной на микроструктурированной подложке. После деформации стенки включается пьезоэлектрический двигатель, который вибрирует кончиком пипетки, открывая отверстие для доставки содержимого внутрь клетки.

«Не все клетки выживают после процедуры, но значительная часть — да», — говорит Ривели. «Клетка способна восстановить отверстие и продолжать расти и делиться».

Поскольку процессы роста и деления дрожжей схожи с таковыми у млекопитающих, они являются полезным модельным организмом для клеточных биологов. Эта техника открывает возможность для новых типов экспериментов как на S. pombe, так и на почкующихся дрожжах S. cerevisiae, которые имеют схожую клеточную стенку.

Источник: Nature Methods 6(7): 513-514 (7 июня 2009)