Лазерный сортировщик клеток (проточный цитофлюориметр)
Лазерный сортировщик клеток, также известный как проточный цитофлюориметр, — это прибор, предназначенный для проточной флюориметрии и последующей сортировки клеток, помеченных флуоресцентными красителями (флуорохромами).
Принцип его работы заключается в следующем:
- Клетки в виде суспензии проходят по тонкой струе через сфокусированный луч лазера.
- При этом каждая клетка рассеивает свет лазера и, если она помечена флуорохромом, испускает флуоресцентное свечение определённой длины волны.
- Детекторы прибора измеряют интенсивность рассеянного света (что даёт информацию о размере и гранулярности клетки) и параметры флуоресценции (что указывает на наличие или количество специфических маркеров).
- На основе заданных пользователем параметров светорассеяния и флуоресценции прибор идентифицирует целевые популяции клеток.
- Для физического разделения струя с клетками разбивается на микроскопические капли. Непосредственно перед образованием капля, содержащая нужную клетку, получает электрический заряд (положительный, отрицательный или остаётся нейтральной).
- Пролетая через электростатическое поле, заряженные капли отклоняются и автоматически собираются в разные пробирки, осуществляя высокоточную сортировку.
Современный контекст
Современные приборы, такие как сортировщики клеток с акронимом FACS (Fluorescence-Activated Cell Sorter), являются стандартным инструментом в иммунологии, онкологии, биологии стволовых клеток и молекулярной биологии. Они позволяют не только анализировать миллионы клеток в секунду по десяткам параметров (многопараметрический анализ), но и с высокой чистотой выделять (сортировать) живые клетки для дальнейшего культивирования или экспериментов. Современные технологии включают сортировку в микропланшеты по одной клетке на лунку, что критически важно для моноклональных исследований и разработки антител.
