Учёные впервые получили in vitro эмбрионы из витрифицированных ооцитов африканского льва
Международная группа учёных из Института зоологии и исследований дикой природы им. Лейбница (Leibniz-IZW, Германия), зоопарка Givskud Zoo–Zootopia (Дания) и Миланского университета (Италия) впервые получила in vitro эмбрионы африканского льва из витрифицированных незрелых ооцитов.
Метод криоконсервации
- Витрификация — метод сверхбыстрой заморозки при -196°C в жидком азоте с использованием растворов с высокой концентрацией криопротекторов.
- Ооциты собирают сразу после кастрации или гибели животного.
- Метод предотвращает образование кристаллов льда, разрушающих клетки, и позволяет хранить генетический материал ценных животных неограниченное время для последующего использования в методах вспомогательной репродукции.
Ход исследования
- Ооциты были получены от четырёх львиц из зоопарка Givskud после их эвтаназии в рамках управления популяцией.
- Экспериментальная группа: 60 ооцитов были немедленно витрифицированы. После 6 дней хранения в жидком азоте их разморозили и подвергли in vitro созреванию в инкубаторе при 39°C в течение 32–34 часов.
- Контрольная группа: 59 ооцитов были подвергнуты in vitro созреванию без этапа витрификации.
- Зрелые ооциты обеих групп оплодотворяли размороженной спермой африканских львов.
Результаты
- В группе витрифицированных ооцитов выжила и созрела высокая доля клеток — почти 50%, что сопоставимо с контрольной группой.
- Из витрифицированной группы развилось семь ранних эмбрионов, из контрольной — три.
- Это первый случай получения in vitro эмбрионов после витрификации ооцитов африканского льва или любого другого вида диких кошачьих.
Значение и перспективы
- Немедленная витрификация на месте — оптимальный вариант для работы с ооцитами кошачьих, что было подтверждено в отдельном исследовании на домашней кошке. Это упрощает транспортировку образцов из зоопарков в лаборатории.
- Хотя ни один из эмбрионов из витрифицированных ооцитов не развился дальше стадии 4-х бластомеров, работа доказала принципиальную возможность криоконсервации ооцитов кошачьих для банков генетических ресурсов.
- Цель исследований — усовершенствовать методы на модельных видах (домашняя кошка, африканский лев) для их применения в сохранении находящихся под угрозой исчезновения видов, таких как азиатский лев.
Исследование опубликовано в журнале Cryobiology.