Флуоресцентная микроскопия

Флуоресцентная микроскопия — метод микроскопии, основанный на способности многих веществ (флуорофоров) светиться (флуоресцировать) в видимом диапазоне при их облучении ультрафиолетовым или синим светом.

Этот метод позволяет:

• Изучать динамические изменения в клетках и их отдельных структурах (органеллах) при различных функциональных состояниях.
• Чётко различать живые и мёртвые клетки, используя специальные флуоресцентные красители (например, акридиновый оранжевый).
• Визуализировать специфические молекулы (например, белки, ДНК) благодаря использованию антител или других зондов, меченных флуорофорами.

Современный контекст

Сегодня флуоресцентная микроскопия является краеугольным камнем клеточной биологии и биомедицинских исследований. Традиционные методы дополнены и расширены такими высокотехнологичными направлениями, как:

• Конфокальная микроскопия, которая позволяет получать трёхмерные изображения клеток, устраняя фоновую засветку.
• Многофотонная микроскопия, менее повреждающая для живых образцов и позволяющая глубже проникать в ткани.
• Микроскопия сверхвысокого разрешения (например, STED, PALM, STORM), которая преодолела дифракционный барьер и позволяет видеть структуры размером в десятки нанометров (Нобелевская премия по химии 2014 года).
• Использование зелёного флуоресцентного белка (GFP) и его спектральных вариантов, что сделало возможным наблюдение за экспрессией генов и локализацией белков в живых клетках в реальном времени (Нобелевская премия по химии 2008 года).