Вирус в действии: захватывающее изображение репликации
Исследователи из Сиднейского университета получили драматичное изображение вируса, реплицирующегося и распространяющегося по клеткам, уничтожая их. Работа была представлена в престижном журнале Cell в рамках Cell Picture Show.
Техника и объект исследования
- Изображение создано с помощью техники, которая также позволяет рассчитать уровень инфекционного вируса в клетках.
- На снимке запечатлен вирус осповакцины (vaccinia virus) — живой вирусный вакцинный штамм, использовавшийся для искоренения натуральной оспы. Он распространяется из одной инфицированной клетки по всему слою клеток почки обезьяны.
Авторы и цель работы
- Исследование провели доктор Тимоти Ньюсом и аспирант Дин Проктер из Школы молекулярной биологии университета в сотрудничестве с коллегами из Австралийского национального университета.
- Работа является частью исследований доктора Ньюсома по изучению роли вирусных генов в биологии вирусов и влияния мутаций в этих генах на способность вирусов вызывать заболевание.
Метод создания изображения
- Ученые работают с идеальным разведением высококонцентрированного вируса, чтобы заразить лишь несколько клеток. Это позволяет отслеживать распространение вируса через слой незараженных клеток.
- Через три дня после начального заражения клетки химически фиксируют, создавая «снимок» инфекции на этой стадии.
- Затем с помощью флуоресцентных химикатов подсвечивают нужные структуры: розовые инфицированные вирусом клетки, желтую ДНК и бирюзовый цитоскелет.
- Итоговое изображение «Око бури» (Eye of the Storm) является композицией нескольких меньших снимков, сделанных в микроскопической лаборатории школы.
Научное значение техники
- Вирусные бляшки (plaques) — это участки инфицированных клеток, имеющие отчетливо иной вид из-за гибели клеток, их движения или изменения структуры.
- Подсчет количества вирусных бляшек в клеточном слое позволяет определить концентрацию вируса в организме хозяина или в лабораторных образцах.
- Степень, в которой вирусы изменяют внешний вид зараженных клеток внутри бляшки, помогает понять патогенность вируса. Эта техника используется в лаборатории для выяснения, влияют ли создаваемые мутации в вирусе на его способность вызывать заболевание.