Мышата родились из яйцеклеток, полученных из гранулёзных клеток

Исследователи из Китая с помощью химического "коктейля" превратили гранулёзные клетки мышей в функциональные ооциты. После оплодотворения эти ооциты успешно дали здоровое потомство, не отличающееся от мышей, выведенных естественным путём. Метод химического репрограммирования описан 24 декабря в журнале Cell Reports.

Фолликул яичника состоит из ооцита (незрелой яйцеклетки), окружённого гранулёзными клетками. Помимо ключевой роли в развитии фолликулов, эти клетки обладают пластичностью и свойствами, подобными стволовым.

"При ЭКО используют только ооцит, а гранулёзные клетки фолликула выбрасывают", — говорит старший автор Линь Лю из Колледжа наук о жизни Нанкайского университета. — "Мы задумались: можно ли их использовать? Если каждый ооцит окружён тысячами гранулёзных клеток, то, превратив их в плюрипотентные клетки, а затем в ооциты, мы решим сразу две задачи".

Гранулёзные клетки вне фолликула склонны к гибели и дифференцировке. Команда Лю разработала химический "коктейль" на основе ингибитора Rock и кротоновой кислоты для создания химически индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (CiPSCs) из гранулёзных клеток. Ингибитор Rock предотвращал гибель клеток и стимулировал их пролиферацию. В комбинации с другими малыми молекулами кротоновая кислота способствовала превращению гранулёзных клеток в плюрипотентные стволовые клетки, компетентные к образованию зародышевой линии, с плюрипотентностью, подобной эмбриональным стволовым клеткам.

"Это удивительный результат, — говорит Лю. — Обычно компетентность индуцированных плюрипотентных клеток к образованию зародышевой линии ниже, чем у эмбриональных стволовых клеток. А с нашей комбинацией эффективность и качество клеток повысились".

Второй "коктейль" из ингибитора Rock и витамина C вводили полученным клеткам, чтобы улучшить развитие фолликулов и индуцировать мейоз — процесс превращения клетки в половые клетки (яйцеклетки). Половые клетки и ооциты, репрограммированные из гранулёзных клеток, показали высокую геномную стабильность и успешно дали потомство с нормальной фертильностью.

"Мы можем точно контролировать концентрацию и время обработки этими малыми молекулами", — отмечает Лю. По сравнению с традиционными методами индукции стволовых клеток, такими как трансфекция (введение транскрипционных факторов в соматические клетки), химическая обработка обеспечивает более высокую управляемость и, вероятно, меньший риск генетической нестабильности.

"Впервые гранулёзные клетки превратили в ооциты. Это важная и интересная работа в биологии развития и репродукции, — заключает Лю. — Но путь от мышей к человеку ещё долог. Я вижу большие перспективы этого метода скорее в сохранении фертильности и эндокринной функции, чем в лечении бесплодия".