3D-трекинг отдельных молекул внутри клеток
Исследователи из Медицинского центра Юго-Западного Техасского университета и Техасского университета в Далласе представили новый метод 3D-визуализации клеток для изучения сложной пространственно-временной динамики транспорта белков.
Основная проблема при изучении таких высокодинамичных процессов в 3D в сложных клеточных монослоях — это вариации толщины клеток и временных характеристик транспорта белков. Предыдущие методы визуализации были медленными и имели плохую z-локализацию и 3D-трекинг способность.
Используя комбинацию многофокальной плоскостной микроскопии (MUM) и технологии нанодот-метки, исследователи смогли маркировать отдельные молекулы в живых клетках и отслеживать их движение и взаимодействие с другими молекулами в толстых клеточных образцах в течение длительного времени.
По словам ведущего автора исследования Шрипада Рама, основная цель разработки этих методов — отслеживать движение терапевтических антител, создаваемых в их лаборатории. «Мы хотим знать, куда направляются эти антитела и что они делают, попав в организм», — говорит Рам.
Он добавляет, что существующие технологии микроскопии ограничены возможностью визуализации только одной фокальной плоскости за раз. При 3D-визуализации последовательно можно пропустить события во времени. «Нам нужна была технология, способная одновременно визуализировать образец в нескольких плоскостях, и именно это обеспечивает многофокальная плоскостная микроскопия».
