Безопасный, дешёвый и эффективный метод медленной заморозки стволовых клеток человека

Человеческие плюрипотентные стволовые клетки (hPSCs) обладают огромным потенциалом в регенеративной медицине. Однако их массовое хранение для исследований представляет сложность.

Учёные из Центра биологии развития RIKEN и Фонда биомедицинских исследований и инноваций разработали экономичный и надёжный метод медленной заморозки для сохранения больших количеств hPSCs с высокой выживаемостью.

Проблема существующих методов:

• Витрификация с жидким азотом требует высокой квалификации и не подходит для создания запасов клеток.
• Обычные методы медленной заморозки имеют низкую выживаемость клеток после оттаивания.

Ключевая проблема: "слипание" клеток в комки во время заморозки, что мешает криопротектору проникнуть внутрь и приводит к гибели клеток.

Решение: Исследователи модифицировали безопасный и доступный замораживающий агент CP-1, добавив в него реагенты для отсоединения клеток, чтобы предотвратить их слипание.

Оптимальный состав (CP-5E):

• Гидроксиэтилкрахмал (натуральный криопротектор растительного происхождения).
• Диметилсульфоксид и этиленгликоль (предотвращают образование кристаллов льда внутри клеток).
• Pronase/EDTA (агент для отсоединения клеток, впервые использованный в криоконсервации).

Результат:

После заморозки при –80 °C в обычном морозильнике и быстрого оттаивания в водяной бане более 80% hPSCs сохранили способность дифференцироваться в зрелые типы клеток.

Механизм: Учёные полагают, что высокая выживаемость частично обусловлена ослабленными связями между клетками благодаря раствору Pronase.

Перспективы: Команда надеется наладить массовое производство CP-5E для исследовательских и клинических применений.